农学学报
農學學報
농학학보
Chinese Countryside Well-off Technology
2012年
11期
6-11
,共6页
丁广洲%侯静%马凤鸣%陈丽%陈连江
丁廣洲%侯靜%馬鳳鳴%陳麗%陳連江
정엄주%후정%마봉명%진려%진련강
甜菜%NADH-NR%gDNA%克隆%酶切鉴定
甜菜%NADH-NR%gDNA%剋隆%酶切鑒定
첨채%NADH-NR%gDNA%극륭%매절감정
为了研究甜菜NADH-NR gDNA的序列特征,从分子水平上为甜菜硝酸盐累积差异机理的研究做铺垫;利用二倍体甜菜品种‘甜研7号’,采用分步克隆方法,分别获得甜菜NADH-NR基因组DNA的3’端序列和5’端序列以及中间序列,再以3’端和5’端序列设计特异引物,克隆获得甜菜NADH-NR基因组DNA的全序列;结果表明,甜菜NADH-NR gDNA全长序列6346bp,经与先前获得的甜菜NADH-NR cDNA序列比对,甜菜NADH-NR gDNA含有3个内含子,4个外显子。内含子大小分别为197、1088、2343bp。甜菜NADH-NR gDNA的外显子序列与菠菜的同源性达到78%,但内含子序列在进化期间发生了较大分化,甜菜NADH-NR gDNA的内含子相对菠菜要大,两者也不处于同样的位点,甜菜NADH-NR gDNA的内含子靠近5'端较早出现,每个内含子大小均是菠菜的1.10~1.71倍。本研究首次从甜菜中克隆获得NADH-NR gDNA全长序列,揭示了其序列特征并将其与其他作物进行了比较分析,为进一步利用该基因开展甜菜硝酸盐含量的基因调控研究奠定了基础。
為瞭研究甜菜NADH-NR gDNA的序列特徵,從分子水平上為甜菜硝痠鹽纍積差異機理的研究做鋪墊;利用二倍體甜菜品種‘甜研7號’,採用分步剋隆方法,分彆穫得甜菜NADH-NR基因組DNA的3’耑序列和5’耑序列以及中間序列,再以3’耑和5’耑序列設計特異引物,剋隆穫得甜菜NADH-NR基因組DNA的全序列;結果錶明,甜菜NADH-NR gDNA全長序列6346bp,經與先前穫得的甜菜NADH-NR cDNA序列比對,甜菜NADH-NR gDNA含有3箇內含子,4箇外顯子。內含子大小分彆為197、1088、2343bp。甜菜NADH-NR gDNA的外顯子序列與菠菜的同源性達到78%,但內含子序列在進化期間髮生瞭較大分化,甜菜NADH-NR gDNA的內含子相對菠菜要大,兩者也不處于同樣的位點,甜菜NADH-NR gDNA的內含子靠近5'耑較早齣現,每箇內含子大小均是菠菜的1.10~1.71倍。本研究首次從甜菜中剋隆穫得NADH-NR gDNA全長序列,揭示瞭其序列特徵併將其與其他作物進行瞭比較分析,為進一步利用該基因開展甜菜硝痠鹽含量的基因調控研究奠定瞭基礎。
위료연구첨채NADH-NR gDNA적서렬특정,종분자수평상위첨채초산염루적차이궤리적연구주포점;이용이배체첨채품충‘첨연7호’,채용분보극륭방법,분별획득첨채NADH-NR기인조DNA적3’단서렬화5’단서렬이급중간서렬,재이3’단화5’단서렬설계특이인물,극륭획득첨채NADH-NR기인조DNA적전서렬;결과표명,첨채NADH-NR gDNA전장서렬6346bp,경여선전획득적첨채NADH-NR cDNA서렬비대,첨채NADH-NR gDNA함유3개내함자,4개외현자。내함자대소분별위197、1088、2343bp。첨채NADH-NR gDNA적외현자서렬여파채적동원성체도78%,단내함자서렬재진화기간발생료교대분화,첨채NADH-NR gDNA적내함자상대파채요대,량자야불처우동양적위점,첨채NADH-NR gDNA적내함자고근5'단교조출현,매개내함자대소균시파채적1.10~1.71배。본연구수차종첨채중극륭획득NADH-NR gDNA전장서렬,게시료기서렬특정병장기여기타작물진행료비교분석,위진일보이용해기인개전첨채초산염함량적기인조공연구전정료기출。