CAJ | 학술논문

目的:探讨cGMP依赖性蛋白激酶Ⅱ(cGMP-dependent protein kinase Ⅱ,PKG Ⅱ)对人胃癌SGC-7901细胞增殖相关的丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)/细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)下游核糖体S6激酶1(ribosomal S6 kinase 1,RSK1)和原癌基因c-Jun、c-Fos的作用.方法:用腺病毒Ad-LacZ和Ad-PKG Ⅱ感染SGC-7901细胞,使细胞高表达PKG Ⅱ;用特异性PKG Ⅱ激活剂8-pCPT-cGMP[8-(p-chlorophenylthio)-cyclic GMP]作用于感染了腺病毒的细胞,再用表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)进行刺激.MTT法检测PKG Ⅱ对EGF刺激引起的SGC-7901细胞增殖的影响,RT-PCR法和蛋白质印迹法分别检测PKG Ⅱ对EGF引起的SGC-7901细胞中c-Jun、c-Fos mRNA和p-RSK1、c-Jun、c-Fos蛋白表达的影响,免疫荧光显微镜下观察p-RSK1在SGC-7901细胞核内的分布情况.结果:8-pCPT-cGMP作用于感染了Ad-PKG Ⅱ的SGC-7901细胞后,EGF对SGC-7901细胞的增殖促进作用和EGF诱导的c-Jun、c-Fos mRNA和蛋白的表达受到抑制,RSK1 (Ser380)磷酸化水平明显降低；EGF刺激后,SGC-7901细胞核内大量累积p-RSK1,8-pCPT-cGMP作用后细胞核内p-RSK1减少.结论:激活的PKG Ⅱ可有效抑制EGF诱导的胃癌细胞的增殖、RSK1 Ser380位点的磷酸化、p-RSK1在细胞核内的累积以及原癌基因c-Jun和c-Fos的表达.
목적:탐토cGMP의뢰성단백격매Ⅱ(cGMP-dependent protein kinase Ⅱ,PKG Ⅱ)대인위암SGC-7901세포증식상관적사렬원활화단백격매(mitogen-activated protein kinase,MAPK)/세포외신호조절격매(extracellular signal-regulated kinase,ERK)하유핵당체S6격매1(ribosomal S6 kinase 1,RSK1)화원암기인c-Jun、c-Fos적작용.방법:용선병독Ad-LacZ화Ad-PKG Ⅱ감염SGC-7901세포,사세포고표체PKG Ⅱ;용특이성PKG Ⅱ격활제8-pCPT-cGMP[8-(p-chlorophenylthio)-cyclic GMP]작용우감염료선병독적세포,재용표피생장인자(epidermal growth factor,EGF)진행자격.MTT법검측PKG Ⅱ대EGF자격인기적SGC-7901세포증식적영향,RT-PCR법화단백질인적법분별검측PKG Ⅱ대EGF인기적SGC-7901세포중c-Jun、c-Fos mRNA화p-RSK1、c-Jun、c-Fos단백표체적영향,면역형광현미경하관찰p-RSK1재SGC-7901세포핵내적분포정황.결과:8-pCPT-cGMP작용우감염료Ad-PKG Ⅱ적SGC-7901세포후,EGF대SGC-7901세포적증식촉진작용화EGF유도적c-Jun、c-Fos mRNA화단백적표체수도억제,RSK1 (Ser380)린산화수평명현강저；EGF자격후,SGC-7901세포핵내대량루적p-RSK1,8-pCPT-cGMP작용후세포핵내p-RSK1감소.결론:격활적PKG Ⅱ가유효억제EGF유도적위암세포적증식、RSK1 Ser380위점적린산화、p-RSK1재세포핵내적루적이급원암기인c-Jun화c-Fos적표체.