延安大学学报（自然科学版）
延安大學學報（自然科學版）
연안대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF YANAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2014年
1期
54-57
,共4页
冯晓东%陈国梁%乔璟%常海飞
馮曉東%陳國樑%喬璟%常海飛
풍효동%진국량%교경%상해비
骏枣%农杆菌%遗传转化%愈伤组织
駿棘%農桿菌%遺傳轉化%愈傷組織
준조%농간균%유전전화%유상조직
采用农杆菌介导法,对骏枣愈伤组织遗传转化体系进行研究.结果表明:进行遗传转化的合适条件为:愈伤诱导培养基MS+6-BA 0.4 mg/L+2,4-D 1.2 mg/L;浸染之前对愈伤组织进行6d的避光培养可提高愈伤组织在共培养过程中的成活率;愈伤组织在OD600=0.4～0.6的农杆菌菌液中浸染10 min,农杆菌LBA4404的生长情况最好;在28℃黑暗条件下共培养放置16 d对转化最适宜;头孢霉素的抑菌浓度为250 mg/L;卡那霉素的筛选浓度为125 mg/L.经PCR检测,初步证明外源目的基因已整合到骏枣基因组中,初步实现了农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化,与以骏枣茎叶外植体建立的遗传转化体系相比,以骏枣愈伤组织为外植体共培养时间长,有利于转化.
採用農桿菌介導法,對駿棘愈傷組織遺傳轉化體繫進行研究.結果錶明:進行遺傳轉化的閤適條件為:愈傷誘導培養基MS+6-BA 0.4 mg/L+2,4-D 1.2 mg/L;浸染之前對愈傷組織進行6d的避光培養可提高愈傷組織在共培養過程中的成活率;愈傷組織在OD600=0.4～0.6的農桿菌菌液中浸染10 min,農桿菌LBA4404的生長情況最好;在28℃黑暗條件下共培養放置16 d對轉化最適宜;頭孢黴素的抑菌濃度為250 mg/L;卡那黴素的篩選濃度為125 mg/L.經PCR檢測,初步證明外源目的基因已整閤到駿棘基因組中,初步實現瞭農桿菌介導的駿棘愈傷組織遺傳轉化,與以駿棘莖葉外植體建立的遺傳轉化體繫相比,以駿棘愈傷組織為外植體共培養時間長,有利于轉化.
채용농간균개도법,대준조유상조직유전전화체계진행연구.결과표명:진행유전전화적합괄조건위:유상유도배양기MS+6-BA 0.4 mg/L+2,4-D 1.2 mg/L;침염지전대유상조직진행6d적피광배양가제고유상조직재공배양과정중적성활솔;유상조직재OD600=0.4～0.6적농간균균액중침염10 min,농간균LBA4404적생장정황최호;재28℃흑암조건하공배양방치16 d대전화최괄의;두포매소적억균농도위250 mg/L;잡나매소적사선농도위125 mg/L.경PCR검측,초보증명외원목적기인이정합도준조기인조중,초보실현료농간균개도적준조유상조직유전전화,여이준조경협외식체건립적유전전화체계상비,이준조유상조직위외식체공배양시간장,유리우전화.
