江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
6期
1278-1282
,共5页
苑侠%孙枫%卢嫣红%周彤%范永坚%周益军
苑俠%孫楓%盧嫣紅%週彤%範永堅%週益軍
원협%손풍%로언홍%주동%범영견%주익군
南方水稻黑条矮缩病毒%SP7-1基因%拟南芥%转化
南方水稻黑條矮縮病毒%SP7-1基因%擬南芥%轉化
남방수도흑조왜축병독%SP7-1기인%의남개%전화
克隆南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)的SP7-1基因,构建植物表达载体并转化拟南芥,为研究SP7-1致病机理提供基础.根据已发表的SRBSDV SP7-1序列,设计特异性引物,通过RT-PCR的方法从感病水稻植株中克隆到完整的SP7-1基因.通过酶切连接,构建了SP7-1植物表达载体pCHF3/SP7-1,通过农杆菌介导的花序浸润法转化野生型拟南芥,获得转化植株T0代种子.对收获的T0代种子进行卡那霉素筛选,获得了4株阳性植株.阳性植株的PCR和RT-PCR分析检测结果表明,构建的SP7-1载体已成功转化拟南芥,病毒SP7-1已经整合至拟南芥基因组中并能正常表达.
剋隆南方水稻黑條矮縮病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)的SP7-1基因,構建植物錶達載體併轉化擬南芥,為研究SP7-1緻病機理提供基礎.根據已髮錶的SRBSDV SP7-1序列,設計特異性引物,通過RT-PCR的方法從感病水稻植株中剋隆到完整的SP7-1基因.通過酶切連接,構建瞭SP7-1植物錶達載體pCHF3/SP7-1,通過農桿菌介導的花序浸潤法轉化野生型擬南芥,穫得轉化植株T0代種子.對收穫的T0代種子進行卡那黴素篩選,穫得瞭4株暘性植株.暘性植株的PCR和RT-PCR分析檢測結果錶明,構建的SP7-1載體已成功轉化擬南芥,病毒SP7-1已經整閤至擬南芥基因組中併能正常錶達.
극륭남방수도흑조왜축병독(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)적SP7-1기인,구건식물표체재체병전화의남개,위연구SP7-1치병궤리제공기출.근거이발표적SRBSDV SP7-1서렬,설계특이성인물,통과RT-PCR적방법종감병수도식주중극륭도완정적SP7-1기인.통과매절련접,구건료SP7-1식물표체재체pCHF3/SP7-1,통과농간균개도적화서침윤법전화야생형의남개,획득전화식주T0대충자.대수획적T0대충자진행잡나매소사선,획득료4주양성식주.양성식주적PCR화RT-PCR분석검측결과표명,구건적SP7-1재체이성공전화의남개,병독SP7-1이경정합지의남개기인조중병능정상표체.
