生物学杂志
生物學雜誌
생물학잡지
JOURNAL OF BIOLOGY
2012年
5期
6-10
,共5页
侯相民%田宏%尚佑军%田永强%刘湘涛
侯相民%田宏%尚祐軍%田永彊%劉湘濤
후상민%전굉%상우군%전영강%류상도
猪瘟病毒%E2结构糖蛋白%多表位抗原%抗原活性
豬瘟病毒%E2結構糖蛋白%多錶位抗原%抗原活性
저온병독%E2결구당단백%다표위항원%항원활성
将猪瘟病毒不同抗原表位基因串联构成重组基因BT21,化学合成后克隆至pMD18-T载体中,然后再将BT21串联基因片段插入原核表达载体pGEX-6P-1.经酶切和测序鉴定后,构建的重组质粒pGEX-BT21转化大肠杆菌BL21(DE3),通过IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE分析,用Glutathione Sepharose 4B亲和层析法纯化目的蛋白和Western blot分析其免疫学活性.结果表明:融合蛋白GST-BT21以可溶形式表达,分子量约为33kDa,与预期大小相符,纯化的重组蛋白可被猪瘟病毒阳性血清所识别,具有良好的免疫学活性.从而为进一步研究该融合蛋白的免疫特性和功能奠定了基础.
將豬瘟病毒不同抗原錶位基因串聯構成重組基因BT21,化學閤成後剋隆至pMD18-T載體中,然後再將BT21串聯基因片段插入原覈錶達載體pGEX-6P-1.經酶切和測序鑒定後,構建的重組質粒pGEX-BT21轉化大腸桿菌BL21(DE3),通過IPTG誘導錶達,錶達產物進行SDS-PAGE分析,用Glutathione Sepharose 4B親和層析法純化目的蛋白和Western blot分析其免疫學活性.結果錶明:融閤蛋白GST-BT21以可溶形式錶達,分子量約為33kDa,與預期大小相符,純化的重組蛋白可被豬瘟病毒暘性血清所識彆,具有良好的免疫學活性.從而為進一步研究該融閤蛋白的免疫特性和功能奠定瞭基礎.
장저온병독불동항원표위기인천련구성중조기인BT21,화학합성후극륭지pMD18-T재체중,연후재장BT21천련기인편단삽입원핵표체재체pGEX-6P-1.경매절화측서감정후,구건적중조질립pGEX-BT21전화대장간균BL21(DE3),통과IPTG유도표체,표체산물진행SDS-PAGE분석,용Glutathione Sepharose 4B친화층석법순화목적단백화Western blot분석기면역학활성.결과표명:융합단백GST-BT21이가용형식표체,분자량약위33kDa,여예기대소상부,순화적중조단백가피저온병독양성혈청소식별,구유량호적면역학활성.종이위진일보연구해융합단백적면역특성화공능전정료기출.
