中国医学科学院学报
中國醫學科學院學報
중국의학과학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE
2012年
6期
556-562
,共7页
田昕%罗颖%闫永波%隋承光%孟凡东%刘云鹏
田昕%囉穎%閆永波%隋承光%孟凡東%劉雲鵬
전흔%라영%염영파%수승광%맹범동%류운붕
食管癌%蟾蜍灵%人端粒酶逆转录酶%细胞核%线粒体%转位
食管癌%蟾蜍靈%人耑粒酶逆轉錄酶%細胞覈%線粒體%轉位
식관암%섬서령%인단립매역전록매%세포핵%선립체%전위
目的 观察蟾蜍灵对人食管鳞癌EC9706细胞增殖及凋亡的影响,探讨其对人端粒酶逆转录酶(hTERT)核-线粒体定位的影响.方法 采用不同浓度蟾蜍灵作用EC9706细胞,CCK-8法测定细胞增殖抑制并计算半数抑制浓度(IC50),PI染色流式细胞仪分析细胞周期,Hoechst 33342染色荧光显微镜观察凋亡核形态改变,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot法及多重免疫荧光标记激光共聚焦显微镜检测hTERT亚细胞定位及蛋白表达.结果 随作用时间及浓度的增加,蟾蜍灵可显著抑制人食管鳞癌EC9706细胞的增殖(P均＜0.01).100 nmol/L蟾蜍灵作用EC9706细胞时,随着作用时间的延长,G1期细胞逐渐减少,S及G2/M期细胞显著增加(P均＜0.05);细胞核发生典型的凋亡形态学改变,凋亡率逐渐增加(P＜0.01).hTERT可表达于EC9706细胞线粒体中,在蟾蜍灵诱导的凋亡过程中,细胞核hTERT的表达减少,而线粒体hTERT的表达则有所增加(P＜0.05).结论 蟾蜍灵可抑制EC9706细胞增殖,诱导其凋亡,细胞周期阻滞于S及G2/M期.hTERT除细胞核外还定位于线粒体中,并在蟾蜍灵诱导的凋亡过程中由细胞核向线粒体转位.
目的 觀察蟾蜍靈對人食管鱗癌EC9706細胞增殖及凋亡的影響,探討其對人耑粒酶逆轉錄酶(hTERT)覈-線粒體定位的影響.方法 採用不同濃度蟾蜍靈作用EC9706細胞,CCK-8法測定細胞增殖抑製併計算半數抑製濃度(IC50),PI染色流式細胞儀分析細胞週期,Hoechst 33342染色熒光顯微鏡觀察凋亡覈形態改變,Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞儀檢測細胞凋亡率,Western blot法及多重免疫熒光標記激光共聚焦顯微鏡檢測hTERT亞細胞定位及蛋白錶達.結果 隨作用時間及濃度的增加,蟾蜍靈可顯著抑製人食管鱗癌EC9706細胞的增殖(P均＜0.01).100 nmol/L蟾蜍靈作用EC9706細胞時,隨著作用時間的延長,G1期細胞逐漸減少,S及G2/M期細胞顯著增加(P均＜0.05);細胞覈髮生典型的凋亡形態學改變,凋亡率逐漸增加(P＜0.01).hTERT可錶達于EC9706細胞線粒體中,在蟾蜍靈誘導的凋亡過程中,細胞覈hTERT的錶達減少,而線粒體hTERT的錶達則有所增加(P＜0.05).結論 蟾蜍靈可抑製EC9706細胞增殖,誘導其凋亡,細胞週期阻滯于S及G2/M期.hTERT除細胞覈外還定位于線粒體中,併在蟾蜍靈誘導的凋亡過程中由細胞覈嚮線粒體轉位.
목적 관찰섬서령대인식관린암EC9706세포증식급조망적영향,탐토기대인단립매역전록매(hTERT)핵-선립체정위적영향.방법 채용불동농도섬서령작용EC9706세포,CCK-8법측정세포증식억제병계산반수억제농도(IC50),PI염색류식세포의분석세포주기,Hoechst 33342염색형광현미경관찰조망핵형태개변,Annexin V-FITC/PI쌍염류식세포의검측세포조망솔,Western blot법급다중면역형광표기격광공취초현미경검측hTERT아세포정위급단백표체.결과 수작용시간급농도적증가,섬서령가현저억제인식관린암EC9706세포적증식(P균＜0.01).100 nmol/L섬서령작용EC9706세포시,수착작용시간적연장,G1기세포축점감소,S급G2/M기세포현저증가(P균＜0.05);세포핵발생전형적조망형태학개변,조망솔축점증가(P＜0.01).hTERT가표체우EC9706세포선립체중,재섬서령유도적조망과정중,세포핵hTERT적표체감소,이선립체hTERT적표체칙유소증가(P＜0.05).결론 섬서령가억제EC9706세포증식,유도기조망,세포주기조체우S급G2/M기.hTERT제세포핵외환정위우선립체중,병재섬서령유도적조망과정중유세포핵향선립체전위.
