遵义医学院学报
遵義醫學院學報
준의의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE ZUNYI
2013年
5期
406-409,412
,共5页
邓文文%赵然尊%龙仙萍%石蓓
鄧文文%趙然尊%龍仙萍%石蓓
산문문%조연존%룡선평%석배
心脏干细胞%细胞分离%酶消化法%磁珠分选法%小鼠
心髒榦細胞%細胞分離%酶消化法%磁珠分選法%小鼠
심장간세포%세포분리%매소화법%자주분선법%소서
目的 建立稳定的小鼠心脏干细胞(cardiac stem cells,CSCs)分离方法,并对体外培养的CSCs进行生物学特性鉴定.方法 选用健康成年CD1小鼠,在无菌条件下取心脏并剪碎,并用Ⅱ型胶原酶和胰蛋白酶反复消化,采用差速离心法去除混合细胞悬液中的心肌细胞,结合免疫磁珠分选法纯化c-kit+ CSCs后,进行流式细胞仪表面标记鉴定.结果 酶消化法和磁珠分选法结合成功分离并纯化了成年小鼠c-kit+ CSCs.磁珠分选前,流式细胞仪表面标记鉴定c-kit+ CD34-CSCs为4.62％;经磁珠分选后c-kit+ CD34-CSCs可达70.23％.结论 酶消化法结合磁珠分选法能成功分离纯化成年小鼠c-kit+ CSCs,且能用于后续体外培养.体外培养时c-kit+ CSCs相对于其它表型标记的心脏干细胞更加稳定,具有较强的扩增能力.相对于心脏组织块培养法,酶消化法可在短期内获得高纯度的c-kit+ CSCs,更有助于心脏干细胞相关信号通道的体外实验研究.
目的 建立穩定的小鼠心髒榦細胞(cardiac stem cells,CSCs)分離方法,併對體外培養的CSCs進行生物學特性鑒定.方法 選用健康成年CD1小鼠,在無菌條件下取心髒併剪碎,併用Ⅱ型膠原酶和胰蛋白酶反複消化,採用差速離心法去除混閤細胞懸液中的心肌細胞,結閤免疫磁珠分選法純化c-kit+ CSCs後,進行流式細胞儀錶麵標記鑒定.結果 酶消化法和磁珠分選法結閤成功分離併純化瞭成年小鼠c-kit+ CSCs.磁珠分選前,流式細胞儀錶麵標記鑒定c-kit+ CD34-CSCs為4.62％;經磁珠分選後c-kit+ CD34-CSCs可達70.23％.結論 酶消化法結閤磁珠分選法能成功分離純化成年小鼠c-kit+ CSCs,且能用于後續體外培養.體外培養時c-kit+ CSCs相對于其它錶型標記的心髒榦細胞更加穩定,具有較彊的擴增能力.相對于心髒組織塊培養法,酶消化法可在短期內穫得高純度的c-kit+ CSCs,更有助于心髒榦細胞相關信號通道的體外實驗研究.
목적 건립은정적소서심장간세포(cardiac stem cells,CSCs)분리방법,병대체외배양적CSCs진행생물학특성감정.방법 선용건강성년CD1소서,재무균조건하취심장병전쇄,병용Ⅱ형효원매화이단백매반복소화,채용차속리심법거제혼합세포현액중적심기세포,결합면역자주분선법순화c-kit+ CSCs후,진행류식세포의표면표기감정.결과 매소화법화자주분선법결합성공분리병순화료성년소서c-kit+ CSCs.자주분선전,류식세포의표면표기감정c-kit+ CD34-CSCs위4.62％;경자주분선후c-kit+ CD34-CSCs가체70.23％.결론 매소화법결합자주분선법능성공분리순화성년소서c-kit+ CSCs,차능용우후속체외배양.체외배양시c-kit+ CSCs상대우기타표형표기적심장간세포경가은정,구유교강적확증능력.상대우심장조직괴배양법,매소화법가재단기내획득고순도적c-kit+ CSCs,경유조우심장간세포상관신호통도적체외실험연구.
