实用预防医学
實用預防醫學
실용예방의학
PRACTICAL PREVENTIVE MEDICINE
2013年
11期
1285-1288
,共4页
胡玉山%刘俊华%庞杏林%候水平%夏丹
鬍玉山%劉俊華%龐杏林%候水平%夏丹
호옥산%류준화%방행림%후수평%하단
猪链球菌2型%谷氨酸脱氢酶%克隆表达
豬鏈毬菌2型%穀氨痠脫氫酶%剋隆錶達
저련구균2형%곡안산탈경매%극륭표체
Streptococcus suis Ⅱ%GDH%Cloning and expression
目的 克隆表达猪链球菌2型诊断性抗原谷氨酸脱氢酶GDH. 方法 根据基因库中的gdh基因序列设计PCR引物,自病人分离株2007SF0165基因组扩增GDH的编码基因gdh,克隆至pMD19-T载体后进行测序分析,并且构建重组表达质粒pGEX4T-2-gdh,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测. 结果 PCR法自猪链球菌2型菌株2007SF0165基因组扩增出约1.3kb的目的片段;序列分析显示猪链球菌的GDH具有GDH蛋白家族Ⅰ的典型保守序列;构建筛选的原核重组表达质粒pGEX4T-2-gdh经诱导表达,获得蛋白相对分子质量为45 kDa目的蛋白. 结论 克隆并表达出猪链球菌2型诊断性抗原GDH,可为进一步研究奠定坚实的基础.
目的 剋隆錶達豬鏈毬菌2型診斷性抗原穀氨痠脫氫酶GDH. 方法 根據基因庫中的gdh基因序列設計PCR引物,自病人分離株2007SF0165基因組擴增GDH的編碼基因gdh,剋隆至pMD19-T載體後進行測序分析,併且構建重組錶達質粒pGEX4T-2-gdh,轉化E.coli BL21(DE3),IPTG誘導錶達,SDS-PAGE檢測. 結果 PCR法自豬鏈毬菌2型菌株2007SF0165基因組擴增齣約1.3kb的目的片段;序列分析顯示豬鏈毬菌的GDH具有GDH蛋白傢族Ⅰ的典型保守序列;構建篩選的原覈重組錶達質粒pGEX4T-2-gdh經誘導錶達,穫得蛋白相對分子質量為45 kDa目的蛋白. 結論 剋隆併錶達齣豬鏈毬菌2型診斷性抗原GDH,可為進一步研究奠定堅實的基礎.
목적 극륭표체저련구균2형진단성항원곡안산탈경매GDH. 방법 근거기인고중적gdh기인서렬설계PCR인물,자병인분리주2007SF0165기인조확증GDH적편마기인gdh,극륭지pMD19-T재체후진행측서분석,병차구건중조표체질립pGEX4T-2-gdh,전화E.coli BL21(DE3),IPTG유도표체,SDS-PAGE검측. 결과 PCR법자저련구균2형균주2007SF0165기인조확증출약1.3kb적목적편단;서렬분석현시저련구균적GDH구유GDH단백가족Ⅰ적전형보수서렬;구건사선적원핵중조표체질립pGEX4T-2-gdh경유도표체,획득단백상대분자질량위45 kDa목적단백. 결론 극륭병표체출저련구균2형진단성항원GDH,가위진일보연구전정견실적기출.
