山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2013年
43期
5-8
,共4页
徐香兰%韩冰%钟启平%王丽%燕杰
徐香蘭%韓冰%鐘啟平%王麗%燕傑
서향란%한빙%종계평%왕려%연걸
RNA干扰%缺氧诱导因子-1α%舌肿瘤%舌癌细胞%肿瘤侵袭%肿瘤迁移%上皮—间质转化%黏着斑激酶
RNA榦擾%缺氧誘導因子-1α%舌腫瘤%舌癌細胞%腫瘤侵襲%腫瘤遷移%上皮—間質轉化%黏著斑激酶
RNA간우%결양유도인자-1α%설종류%설암세포%종류침습%종류천이%상피—간질전화%점착반격매
RNA interference%hypoxia-inducible factor-1α%tongue neoplasms%tongue cancer cells%tumor invasion%tumor migration%epithelial-mesenchymal transition%focal adhesion kinase
目的 观察RNA干扰沉默缺氧诱导因子-1α (HIF-1α)基因对人舌癌细胞Tca8113侵袭和迁移的影响.方法 将3个shRNA序列质粒导入pGCsi-H1/Hygro/GFPshRNA质粒表达载体,并将重组质粒经脂质体介导转染人舌癌细胞Tca8113(siHIF-1α组),转染阴性对照质粒的细胞作为空载组.半定量RT-PCR及Western blot法检测HIF-1α的mRNA及蛋白,细胞侵袭实验和划痕实验检测Tca8113的侵袭和迁移能力,同时采用Western blot法检测其上皮-间质转化(EMT)相关标志蛋白和黏着斑激酶(FAK)、磷酸化FAK(P-FAK).结果 测序证实成功构建了HIF-1α shRNA重组质粒(分别为sh1、sh2、sh3),将sh3,转染Tca8113后进行低氧培养,HIF-1α基因表达显著被抑制.与空载组相比,转染sh3的siHIF-1α组穿透Matrigel胶的细胞数明显减少,且迁移能力也显著下降,两组相比,P均＜0.05.与对照组(未转染质粒的Tca8113)相比,siHIF-1α组EMT相关标志蛋白和p-FAK蛋白表达下降,两组相比,P均＜0.05.结论 RNA干扰沉默HIF-1α基因能有效抑制舌癌细胞的侵袭和迁移,在一定程度上可以逆转舌癌细胞的恶性表型.
目的 觀察RNA榦擾沉默缺氧誘導因子-1α (HIF-1α)基因對人舌癌細胞Tca8113侵襲和遷移的影響.方法 將3箇shRNA序列質粒導入pGCsi-H1/Hygro/GFPshRNA質粒錶達載體,併將重組質粒經脂質體介導轉染人舌癌細胞Tca8113(siHIF-1α組),轉染陰性對照質粒的細胞作為空載組.半定量RT-PCR及Western blot法檢測HIF-1α的mRNA及蛋白,細胞侵襲實驗和劃痕實驗檢測Tca8113的侵襲和遷移能力,同時採用Western blot法檢測其上皮-間質轉化(EMT)相關標誌蛋白和黏著斑激酶(FAK)、燐痠化FAK(P-FAK).結果 測序證實成功構建瞭HIF-1α shRNA重組質粒(分彆為sh1、sh2、sh3),將sh3,轉染Tca8113後進行低氧培養,HIF-1α基因錶達顯著被抑製.與空載組相比,轉染sh3的siHIF-1α組穿透Matrigel膠的細胞數明顯減少,且遷移能力也顯著下降,兩組相比,P均＜0.05.與對照組(未轉染質粒的Tca8113)相比,siHIF-1α組EMT相關標誌蛋白和p-FAK蛋白錶達下降,兩組相比,P均＜0.05.結論 RNA榦擾沉默HIF-1α基因能有效抑製舌癌細胞的侵襲和遷移,在一定程度上可以逆轉舌癌細胞的噁性錶型.
목적 관찰RNA간우침묵결양유도인자-1α (HIF-1α)기인대인설암세포Tca8113침습화천이적영향.방법 장3개shRNA서렬질립도입pGCsi-H1/Hygro/GFPshRNA질립표체재체,병장중조질립경지질체개도전염인설암세포Tca8113(siHIF-1α조),전염음성대조질립적세포작위공재조.반정량RT-PCR급Western blot법검측HIF-1α적mRNA급단백,세포침습실험화화흔실험검측Tca8113적침습화천이능력,동시채용Western blot법검측기상피-간질전화(EMT)상관표지단백화점착반격매(FAK)、린산화FAK(P-FAK).결과 측서증실성공구건료HIF-1α shRNA중조질립(분별위sh1、sh2、sh3),장sh3,전염Tca8113후진행저양배양,HIF-1α기인표체현저피억제.여공재조상비,전염sh3적siHIF-1α조천투Matrigel효적세포수명현감소,차천이능력야현저하강,량조상비,P균＜0.05.여대조조(미전염질립적Tca8113)상비,siHIF-1α조EMT상관표지단백화p-FAK단백표체하강,량조상비,P균＜0.05.결론 RNA간우침묵HIF-1α기인능유효억제설암세포적침습화천이,재일정정도상가이역전설암세포적악성표형.
