医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2013年
6期
323-327
,共5页
曹运长%冷超群%文红波%许金华
曹運長%冷超群%文紅波%許金華
조운장%랭초군%문홍파%허금화
miR-29b%人脐静脉内皮细胞%TNF-α%增殖%凋亡
miR-29b%人臍靜脈內皮細胞%TNF-α%增殖%凋亡
miR-29b%인제정맥내피세포%TNF-α%증식%조망
目的 探索过表达miR-29b对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖与凋亡的影响及初步作用机制.方法 MTT法筛选TNF-α诱导HUVECs的最佳浓度和时间,建立细胞凋亡模型;MTT法筛选miR-29b mimic转染HUVECs的最佳转染时间和浓度;MTT法检测过表达miR-29b对TNF-α诱导HUVECs增殖活力的影响;Hoechst 33342荧光染色检测过表达miR-29b对TNF-α诱导HUVECs凋亡的影响;Western印迹技术检测过表达miR-29b对Akt磷酸化水平、Bcl-2 蛋白表达的影响.结果 TNF-α诱导的HUVECs凋亡的最佳浓度为10 ng/ml,最佳时间是48 h;miR-29b mimics转染HUVECs的最佳浓度为50 nmol/L,最佳作用时间是48 h;过表达miR-29b能显著降低TNF-α诱导的HUVECs的增殖活力(P＜0.001);Heochst33342荧光染色结果显示,miR-29b过表达能促进TNF-α诱导的HUVECs的凋亡(P＜0.05);过表达miR-29b 能显著下调Akt磷酸化(p-Akt)与Bcl-2蛋白的表达(P＜0.001).结论 过表达miR-29b可降低TNF-α诱导的HUVECs的增殖活力并促进其凋亡,其机制可能与下调Akt磷酸化、Bcl-2 蛋白的表达相关.
目的 探索過錶達miR-29b對TNF-α誘導的人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)增殖與凋亡的影響及初步作用機製.方法 MTT法篩選TNF-α誘導HUVECs的最佳濃度和時間,建立細胞凋亡模型;MTT法篩選miR-29b mimic轉染HUVECs的最佳轉染時間和濃度;MTT法檢測過錶達miR-29b對TNF-α誘導HUVECs增殖活力的影響;Hoechst 33342熒光染色檢測過錶達miR-29b對TNF-α誘導HUVECs凋亡的影響;Western印跡技術檢測過錶達miR-29b對Akt燐痠化水平、Bcl-2 蛋白錶達的影響.結果 TNF-α誘導的HUVECs凋亡的最佳濃度為10 ng/ml,最佳時間是48 h;miR-29b mimics轉染HUVECs的最佳濃度為50 nmol/L,最佳作用時間是48 h;過錶達miR-29b能顯著降低TNF-α誘導的HUVECs的增殖活力(P＜0.001);Heochst33342熒光染色結果顯示,miR-29b過錶達能促進TNF-α誘導的HUVECs的凋亡(P＜0.05);過錶達miR-29b 能顯著下調Akt燐痠化(p-Akt)與Bcl-2蛋白的錶達(P＜0.001).結論 過錶達miR-29b可降低TNF-α誘導的HUVECs的增殖活力併促進其凋亡,其機製可能與下調Akt燐痠化、Bcl-2 蛋白的錶達相關.
목적 탐색과표체miR-29b대TNF-α유도적인제정맥내피세포(HUVECs)증식여조망적영향급초보작용궤제.방법 MTT법사선TNF-α유도HUVECs적최가농도화시간,건립세포조망모형;MTT법사선miR-29b mimic전염HUVECs적최가전염시간화농도;MTT법검측과표체miR-29b대TNF-α유도HUVECs증식활력적영향;Hoechst 33342형광염색검측과표체miR-29b대TNF-α유도HUVECs조망적영향;Western인적기술검측과표체miR-29b대Akt린산화수평、Bcl-2 단백표체적영향.결과 TNF-α유도적HUVECs조망적최가농도위10 ng/ml,최가시간시48 h;miR-29b mimics전염HUVECs적최가농도위50 nmol/L,최가작용시간시48 h;과표체miR-29b능현저강저TNF-α유도적HUVECs적증식활력(P＜0.001);Heochst33342형광염색결과현시,miR-29b과표체능촉진TNF-α유도적HUVECs적조망(P＜0.05);과표체miR-29b 능현저하조Akt린산화(p-Akt)여Bcl-2단백적표체(P＜0.001).결론 과표체miR-29b가강저TNF-α유도적HUVECs적증식활력병촉진기조망,기궤제가능여하조Akt린산화、Bcl-2 단백적표체상관.
