上海交通大学学报(农业科学版)
上海交通大學學報(農業科學版)
상해교통대학학보(농업과학판)
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(AGRICULTURAL SCIENCE)
2012年
6期
22-31,35
,共11页
付雪晴%郭新波%尤丽佳%唐岳立%程海祺%王国丰%唐克轩
付雪晴%郭新波%尤麗佳%唐嶽立%程海祺%王國豐%唐剋軒
부설청%곽신파%우려가%당악립%정해기%왕국봉%당극헌
八氢番茄红素合成酶%三磷酸腺苷环化水解酶%转基因生菜%类胡萝卜素%叶酸%高效液相色谱
八氫番茄紅素閤成酶%三燐痠腺苷環化水解酶%轉基因生菜%類鬍蘿蔔素%葉痠%高效液相色譜
팔경번가홍소합성매%삼린산선감배화수해매%전기인생채%류호라복소%협산%고효액상색보
通过农杆菌介导的遗传转化法将拟南芥八氢番茄红素合成酶基因(phytoene synthase,Atpsy)和按照拟南芥偏爱密码子人工合成的编码三磷酸腺苷环化水解酶(GTP cyclohydrolase,GCHI)的folE基因共同转入罗曼生菜中,通过Realtime-PCR、HPLC、干酪乳杆菌发酵法分别测定了转基因生菜中目标基因的表达量、叶黄素和β-胡萝卜素含量以及总叶酸含量.实验结果表明:转基因生菜中Atpsy基因表达量为野生型的43.54倍,folE基因表达量为野生型的38.05倍;转基因生菜植株叶黄素和β-胡萝卜素含量与野生型相比均有提高,含量最好的转基因植株L13中叶黄素含量为7.1mg/kg(鲜重,下同),是野生型对照6.8 mg/kg的1.1倍,β-胡萝卜素含量为592.6mg/kg,是野生型对照196.9 mg/kg的3倍;叶酸含量最高是2 083.4 mg/kg,为野生型对照1129.1mg/kg的1.85倍.该研究为通过基因工程手段改良类胡萝卜素和叶酸在植物体内的代谢途径,获得同时富含类胡萝卜素和叶酸的新型生菜品种打下了基础.
通過農桿菌介導的遺傳轉化法將擬南芥八氫番茄紅素閤成酶基因(phytoene synthase,Atpsy)和按照擬南芥偏愛密碼子人工閤成的編碼三燐痠腺苷環化水解酶(GTP cyclohydrolase,GCHI)的folE基因共同轉入囉曼生菜中,通過Realtime-PCR、HPLC、榦酪乳桿菌髮酵法分彆測定瞭轉基因生菜中目標基因的錶達量、葉黃素和β-鬍蘿蔔素含量以及總葉痠含量.實驗結果錶明:轉基因生菜中Atpsy基因錶達量為野生型的43.54倍,folE基因錶達量為野生型的38.05倍;轉基因生菜植株葉黃素和β-鬍蘿蔔素含量與野生型相比均有提高,含量最好的轉基因植株L13中葉黃素含量為7.1mg/kg(鮮重,下同),是野生型對照6.8 mg/kg的1.1倍,β-鬍蘿蔔素含量為592.6mg/kg,是野生型對照196.9 mg/kg的3倍;葉痠含量最高是2 083.4 mg/kg,為野生型對照1129.1mg/kg的1.85倍.該研究為通過基因工程手段改良類鬍蘿蔔素和葉痠在植物體內的代謝途徑,穫得同時富含類鬍蘿蔔素和葉痠的新型生菜品種打下瞭基礎.
통과농간균개도적유전전화법장의남개팔경번가홍소합성매기인(phytoene synthase,Atpsy)화안조의남개편애밀마자인공합성적편마삼린산선감배화수해매(GTP cyclohydrolase,GCHI)적folE기인공동전입라만생채중,통과Realtime-PCR、HPLC、간락유간균발효법분별측정료전기인생채중목표기인적표체량、협황소화β-호라복소함량이급총협산함량.실험결과표명:전기인생채중Atpsy기인표체량위야생형적43.54배,folE기인표체량위야생형적38.05배;전기인생채식주협황소화β-호라복소함량여야생형상비균유제고,함량최호적전기인식주L13중협황소함량위7.1mg/kg(선중,하동),시야생형대조6.8 mg/kg적1.1배,β-호라복소함량위592.6mg/kg,시야생형대조196.9 mg/kg적3배;협산함량최고시2 083.4 mg/kg,위야생형대조1129.1mg/kg적1.85배.해연구위통과기인공정수단개량류호라복소화협산재식물체내적대사도경,획득동시부함류호라복소화협산적신형생채품충타하료기출.