高山离子芥冷诱导基因转化甘蔗二元植物表达载体构建
고산리자개랭유도기인전화감자이원식물표체재체구건
Construction of bivalent plant expression vector with cold-induced gene of Chorispora bungeana in sugarcane
  • 万方数据
    南方农业学报 남방농업학보
    GUANGXI AGRICULTURAL SCIENCES
    2012年 9期 1262-1268 ,共7页

    卢双楠%李粲%滕峥%刘开雨%刘芳%邱永福%梁朝旭%方位宽%何姗珊%刘晓静%李鸣%梁俊%李容柏

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    Cbcor15a%甘蔗%转基因%植物表达载体构建%瞬时表达 Cbcor15a%甘蔗%轉基因%植物錶達載體構建%瞬時錶達
    Cbcor15a%감자%전기인%식물표체재체구건%순시표체
    [目的]利用载体重组技术分别将高山离子芥冷诱导基因(Cbcor15a)和报告基因eGF插入载体pCambia1300-bar,并引入玉米泛素基因启动子UBi-1代替载体本身启动子CaMV 35s,重组为适合甘蔗转基因的二元植物表达载体pCambia 1300-cbcor 15a-bar.[方法]参照pCambia1300-bar载体多克隆位点和基因Cbcor15a、eGFP和启动子UBi-1的核苷酸序列设计引物,通过载体重组技术将基因和启动子分别插入相应的位点.利用基因枪分别将pCambia1300-bar载体和重组载体导入洋葱表皮细胞,用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察.[结果]与导入pCambia 1300-bar载体的洋葱表皮细胞相比较,导入重组载体pCambia1300-cbcor15a-bar的洋葱表皮细胞内有强烈的绿色荧光信号.[结论]重组甘蔗转基因二元植物表达载体启动子Ubi-1能够调控下游冷诱导基因Cbcor15a和报告基因eGFP的正常高效表达,为外源基因Cbcor15a转化甘蔗提供保障.
    [목적]이용재체중조기술분별장고산리자개랭유도기인(Cbcor15a)화보고기인eGF삽입재체pCambia1300-bar,병인입옥미범소기인계동자UBi-1대체재체본신계동자CaMV 35s,중조위괄합감자전기인적이원식물표체재체pCambia 1300-cbcor 15a-bar.[방법]삼조pCambia1300-bar재체다극륭위점화기인Cbcor15a、eGFP화계동자UBi-1적핵감산서렬설계인물,통과재체중조기술장기인화계동자분별삽입상응적위점.이용기인창분별장pCambia1300-bar재체화중조재체도입양총표피세포,용형광현미경화격광공취초현미경관찰.[결과]여도입pCambia 1300-bar재체적양총표피세포상비교,도입중조재체pCambia1300-cbcor15a-bar적양총표피세포내유강렬적록색형광신호.[결론]중조감자전기인이원식물표체재체계동자Ubi-1능구조공하유랭유도기인Cbcor15a화보고기인eGFP적정상고효표체,위외원기인Cbcor15a전화감자제공보장.
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