湖北医药学院学报
湖北醫藥學院學報
호북의약학원학보
JOURNAL OF HUBAI UNIVERSITY OF MEDICINE
2012年
2期
114-118
,共5页
王小莉%尹世学%刘乔%江德巧%李东升
王小莉%尹世學%劉喬%江德巧%李東升
왕소리%윤세학%류교%강덕교%리동승
Ins1基因%重亚硫酸盐测序法%焦磷酸测序法%DNA甲基化
Ins1基因%重亞硫痠鹽測序法%焦燐痠測序法%DNA甲基化
Ins1기인%중아류산염측서법%초린산측서법%DNA갑기화
目的:研究大鼠Ins1(Insulin 1)基因启动子在各种组织中DNA甲基化的状态及在转化分化过程中甲基化的变化情况,为从表观遗传学方面研究Ins1基因表达调控的机制奠定基础.方法:通过RT-PCR检测大鼠胰岛、大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1)及大鼠肝干细胞(WB)中Ins1基因的表达情况.采用重亚硫酸盐测序法分析这三种细胞位于转录起始位点上游400 bp的Ins1基因启动子区域DNA甲基化的状态,并用焦磷酸测序法分析大鼠肺、脾、皮肤、小肠、脂肪和肝脏组织的甲基化状态及WB细胞转入PDX1慢病毒后甲基化的变化情况.结果:大鼠胰岛和INS-1细胞中Ins1基因高表达,启动子区域的甲基化程度非常低,而在大鼠肺、脾、皮肤、小肠、脂肪、肝脏组织和WB细胞中Ins1基因不表达,启动子区域的甲基化程度很高,当WB细胞转入PDXI慢病毒后可使Ins1基因启动子区域的甲基化程度降低.结论:Ins1基因的表达受甲基化调控,PDX1单个转录因子虽可降低Ins1基因甲基化程度但并不能使其完全去甲基化并表达Ins1基因.
目的:研究大鼠Ins1(Insulin 1)基因啟動子在各種組織中DNA甲基化的狀態及在轉化分化過程中甲基化的變化情況,為從錶觀遺傳學方麵研究Ins1基因錶達調控的機製奠定基礎.方法:通過RT-PCR檢測大鼠胰島、大鼠胰島素瘤細胞(INS-1)及大鼠肝榦細胞(WB)中Ins1基因的錶達情況.採用重亞硫痠鹽測序法分析這三種細胞位于轉錄起始位點上遊400 bp的Ins1基因啟動子區域DNA甲基化的狀態,併用焦燐痠測序法分析大鼠肺、脾、皮膚、小腸、脂肪和肝髒組織的甲基化狀態及WB細胞轉入PDX1慢病毒後甲基化的變化情況.結果:大鼠胰島和INS-1細胞中Ins1基因高錶達,啟動子區域的甲基化程度非常低,而在大鼠肺、脾、皮膚、小腸、脂肪、肝髒組織和WB細胞中Ins1基因不錶達,啟動子區域的甲基化程度很高,噹WB細胞轉入PDXI慢病毒後可使Ins1基因啟動子區域的甲基化程度降低.結論:Ins1基因的錶達受甲基化調控,PDX1單箇轉錄因子雖可降低Ins1基因甲基化程度但併不能使其完全去甲基化併錶達Ins1基因.
목적:연구대서Ins1(Insulin 1)기인계동자재각충조직중DNA갑기화적상태급재전화분화과정중갑기화적변화정황,위종표관유전학방면연구Ins1기인표체조공적궤제전정기출.방법:통과RT-PCR검측대서이도、대서이도소류세포(INS-1)급대서간간세포(WB)중Ins1기인적표체정황.채용중아류산염측서법분석저삼충세포위우전록기시위점상유400 bp적Ins1기인계동자구역DNA갑기화적상태,병용초린산측서법분석대서폐、비、피부、소장、지방화간장조직적갑기화상태급WB세포전입PDX1만병독후갑기화적변화정황.결과:대서이도화INS-1세포중Ins1기인고표체,계동자구역적갑기화정도비상저,이재대서폐、비、피부、소장、지방、간장조직화WB세포중Ins1기인불표체,계동자구역적갑기화정도흔고,당WB세포전입PDXI만병독후가사Ins1기인계동자구역적갑기화정도강저.결론:Ins1기인적표체수갑기화조공,PDX1단개전록인자수가강저Ins1기인갑기화정도단병불능사기완전거갑기화병표체Ins1기인.
