CAJ | 학술논문

目的:探索乙型脑炎病毒(JEV)疫苗株SA14-14-2包膜蛋白279位氨基酸(E279)MK回复突变(M279K)对其毒力的影响.方法:用重叠延伸PCR技术和基因克隆技术构建含有SA14-14-2包膜蛋白M279K突变的全长cDNA质粒pACNR-JEV(M279K),并以其为模板体外转录RNA,将RNA电转染导入BHK21细胞得到恢复病毒rJEV(M279K),并比较恢复病毒和疫苗病毒在蚀斑大小以及对小鼠神经毒力等方面的差别.结果:酶切及测序表明质粒模板成功构建,除人为引入的突变外(碱基1813处T→A),无任何碱基突变,并发现rJEV(M279K)形成比疫苗株更小的蚀斑,但毒力与疫苗株无显著差异.结论:E279回复突变影响乙脑疫苗SA14-14-2病毒蚀斑大小,但并未明显增强疫苗株对小鼠的神经毒力.
목적:탐색을형뇌염병독(JEV)역묘주SA14-14-2포막단백279위안기산(E279)MK회복돌변(M279K)대기독력적영향.방법:용중첩연신PCR기술화기인극륭기술구건함유SA14-14-2포막단백M279K돌변적전장cDNA질립pACNR-JEV(M279K),병이기위모판체외전록RNA,장RNA전전염도입BHK21세포득도회복병독rJEV(M279K),병비교회복병독화역묘병독재식반대소이급대소서신경독력등방면적차별.결과:매절급측서표명질립모판성공구건,제인위인입적돌변외(감기1813처T→A),무임하감기돌변,병발현rJEV(M279K)형성비역묘주경소적식반,단독력여역묘주무현저차이.결론:E279회복돌변영향을뇌역묘SA14-14-2병독식반대소,단병미명현증강역묘주대소서적신경독력.