上海农业学报
上海農業學報
상해농업학보
ACTA AGRICULTURAE SHANGHAI
2014年
2期
22-25
,共4页
刘成倩%王静%于宗幸%李红%易建中%陈磊
劉成倩%王靜%于宗倖%李紅%易建中%陳磊
류성천%왕정%우종행%리홍%역건중%진뢰
猪繁殖与呼吸综合征病毒%M基因%原核表达%表达载体%重组蛋白
豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%M基因%原覈錶達%錶達載體%重組蛋白
저번식여호흡종합정병독%M기인%원핵표체%표체재체%중조단백
PRRSV%M gene%Prokaryotic expression%Expression vector%Recombinant protein
根据GenBank上已公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核酸序列设计1对引物,用RT-PCR方法扩增出去除部分疏水区的PRRSV-M基因,并将其克隆到原核表达载体PET-30a上,得到重组质粒PET-30a-M.将重组质粒转化大肠杆菌transetta(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达、SDS-PAGE电泳及Western blot分析,显示重组蛋白分子量约15.7 kD,且此蛋白能与His标签单克隆抗体发生特异性反应.
根據GenBank上已公佈的豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)覈痠序列設計1對引物,用RT-PCR方法擴增齣去除部分疏水區的PRRSV-M基因,併將其剋隆到原覈錶達載體PET-30a上,得到重組質粒PET-30a-M.將重組質粒轉化大腸桿菌transetta(DE3)感受態細胞,經IPTG誘導錶達、SDS-PAGE電泳及Western blot分析,顯示重組蛋白分子量約15.7 kD,且此蛋白能與His標籤單剋隆抗體髮生特異性反應.
근거GenBank상이공포적저번식여호흡종합정병독(PRRSV)핵산서렬설계1대인물,용RT-PCR방법확증출거제부분소수구적PRRSV-M기인,병장기극륭도원핵표체재체PET-30a상,득도중조질립PET-30a-M.장중조질립전화대장간균transetta(DE3)감수태세포,경IPTG유도표체、SDS-PAGE전영급Western blot분석,현시중조단백분자량약15.7 kD,차차단백능여His표첨단극륭항체발생특이성반응.
