温州医科大学学报
溫州醫科大學學報
온주의과대학학보
Journal of Wenzhou Medical University
2014年
3期
201-204
,共4页
洪卫文%苏国强%应红安%林峰%梁卫东
洪衛文%囌國彊%應紅安%林峰%樑衛東
홍위문%소국강%응홍안%림봉%량위동
黏着斑激酶%RNA干扰%SW620%结直肠肿瘤%转移
黏著斑激酶%RNA榦擾%SW620%結直腸腫瘤%轉移
점착반격매%RNA간우%SW620%결직장종류%전이
focal adhesion kinase%RNA interference%SW620%colorectal neoplasms%metastasis
目的:构建稳定沉默黏着斑激酶(FAK)结肠癌细胞株SW620.方法:用构建好的FAK RNA干扰(RNAi)慢病毒载体pLL3.7 FAK及插入无沉默功能序列的阴性对照慢病毒载体pLL3.7,在293FT细胞中包装成慢病毒,感染体外培养结肠癌SW620细胞,作为实验组和阴性对照组,未感染病毒的SW620细胞作为未处理组,通过荧光倒置显微镜检测SW620细胞的感染效率,运用RT-PCR、Western blot方法测定FAK的表达情况,建立稳定转染细胞株.结果:成功包装了靶向FAK的RNAi慢病毒,感染效率＞90％,稳定转染细胞株构建成功.RT-PCR及Western blot方法检测发现实验组与阴性对照组及未处理组相比,FAK的表达明显降低.结论:稳定沉默FAK的RNAi SW620细胞构建成功.
目的:構建穩定沉默黏著斑激酶(FAK)結腸癌細胞株SW620.方法:用構建好的FAK RNA榦擾(RNAi)慢病毒載體pLL3.7 FAK及插入無沉默功能序列的陰性對照慢病毒載體pLL3.7,在293FT細胞中包裝成慢病毒,感染體外培養結腸癌SW620細胞,作為實驗組和陰性對照組,未感染病毒的SW620細胞作為未處理組,通過熒光倒置顯微鏡檢測SW620細胞的感染效率,運用RT-PCR、Western blot方法測定FAK的錶達情況,建立穩定轉染細胞株.結果:成功包裝瞭靶嚮FAK的RNAi慢病毒,感染效率＞90％,穩定轉染細胞株構建成功.RT-PCR及Western blot方法檢測髮現實驗組與陰性對照組及未處理組相比,FAK的錶達明顯降低.結論:穩定沉默FAK的RNAi SW620細胞構建成功.
목적:구건은정침묵점착반격매(FAK)결장암세포주SW620.방법:용구건호적FAK RNA간우(RNAi)만병독재체pLL3.7 FAK급삽입무침묵공능서렬적음성대조만병독재체pLL3.7,재293FT세포중포장성만병독,감염체외배양결장암SW620세포,작위실험조화음성대조조,미감염병독적SW620세포작위미처리조,통과형광도치현미경검측SW620세포적감염효솔,운용RT-PCR、Western blot방법측정FAK적표체정황,건립은정전염세포주.결과:성공포장료파향FAK적RNAi만병독,감염효솔＞90％,은정전염세포주구건성공.RT-PCR급Western blot방법검측발현실험조여음성대조조급미처리조상비,FAK적표체명현강저.결론:은정침묵FAK적RNAi SW620세포구건성공.
