CAJ | 학술논문

以来源于橄榄成熟胚的橄榄试管苗为材料,进行PPO基因克隆,比较试管苗不同保存阶段PPO基因转录水平和PPO酶活性的变化.结果表明:克隆获得1个PPO基因全长cDNA序列,命名为PPO2,GenBank登录号为JQ319005,cDNA全长序列为1 934 bp,推测出橄榄PPO开放阅读框(ORF)1 818 bp,编码606个氨基酸.橄榄PPO2属于碱性、亲水、非分泌蛋白,可能定位于线粒体基质空间,具有3个典型的保守结构域,丝氨酸磷酸化占主导地位,并且二级结构以不规则卷曲为主.而三级结构预测表明,橄榄试管苗PPO2蛋白主要由α螺旋和不规则卷曲组成;进化树分析显示橄榄PPO蛋白与胡杨PPO关系最近,而与葡萄和莲的亲缘关系较远;qPCR分析显示,PPO2基因在橄榄试管苗不同保存阶段都有表达,但在橄榄试管苗保存1个月幼叶比较多时PPO2基因的表达量最高;而橄榄试管苗在分别保存1、2、3、4、5个月时PPO活性变化趋势不明显,当保存时间到6、7、8个月时PPO活性急剧增加.因此,PPO基因可能与幼嫩组织的启动分化有关,并在橄榄试管苗生长发育过程中发挥重要作用.
이래원우감람성숙배적감람시관묘위재료,진행PPO기인극륭,비교시관묘불동보존계단PPO기인전록수평화PPO매활성적변화.결과표명:극륭획득1개PPO기인전장cDNA서렬,명명위PPO2,GenBank등록호위JQ319005,cDNA전장서렬위1 934 bp,추측출감람PPO개방열독광(ORF)1 818 bp,편마606개안기산.감람PPO2속우감성、친수、비분비단백,가능정위우선립체기질공간,구유3개전형적보수결구역,사안산린산화점주도지위,병차이급결구이불규칙권곡위주.이삼급결구예측표명,감람시관묘PPO2단백주요유α라선화불규칙권곡조성;진화수분석현시감람PPO단백여호양PPO관계최근,이여포도화련적친연관계교원;qPCR분석현시,PPO2기인재감람시관묘불동보존계단도유표체,단재감람시관묘보존1개월유협비교다시PPO2기인적표체량최고;이감람시관묘재분별보존1、2、3、4、5개월시PPO활성변화추세불명현,당보존시간도6、7、8개월시PPO활성급극증가.인차,PPO기인가능여유눈조직적계동분화유관,병재감람시관묘생장발육과정중발휘중요작용.