热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2014年
4期
718-723
,共6页
景晓辉%吴伦英%沈雁%赵辉%吴琳
景曉輝%吳倫英%瀋雁%趙輝%吳琳
경효휘%오륜영%침안%조휘%오림
苜蓿防卫素基因%原核表达%抗真菌活性%多主棒孢菌%胶孢炭疽菌
苜蓿防衛素基因%原覈錶達%抗真菌活性%多主棒孢菌%膠孢炭疽菌
목숙방위소기인%원핵표체%항진균활성%다주봉포균%효포탄저균
Medicago truncatula Defensin gene MtDef4%Prokaryotic expression%Antifungal activity%Corynespora cassiicola%Collectotrichum gloeosporioides
为研究苜蓿(Medicago truncatula)防卫素基因MtDef4的抑菌功能,以含有该基因片段的质粒pAND-MtDef4 为模板,扩增出相应的目的基因,测序正确后将MtDef4基因片段连接到带有GST标签的原核表达载体pGEX6P-1中,转化大肠杆菌TransB (DE3),经IPTG诱导,Glutathione Sepharose 4B亲和纯化,通过SDS-PAGE 电泳及Western blot确定融合蛋白的表达.体外抑菌试验表明,MtDef4能够抑制病原真菌Corynespora cassiicola 而非Collectotrichum gloeosporioides的生长.本研究结果可为进一步培育转基因橡胶抗病品种奠定基础.
為研究苜蓿(Medicago truncatula)防衛素基因MtDef4的抑菌功能,以含有該基因片段的質粒pAND-MtDef4 為模闆,擴增齣相應的目的基因,測序正確後將MtDef4基因片段連接到帶有GST標籤的原覈錶達載體pGEX6P-1中,轉化大腸桿菌TransB (DE3),經IPTG誘導,Glutathione Sepharose 4B親和純化,通過SDS-PAGE 電泳及Western blot確定融閤蛋白的錶達.體外抑菌試驗錶明,MtDef4能夠抑製病原真菌Corynespora cassiicola 而非Collectotrichum gloeosporioides的生長.本研究結果可為進一步培育轉基因橡膠抗病品種奠定基礎.
위연구목숙(Medicago truncatula)방위소기인MtDef4적억균공능,이함유해기인편단적질립pAND-MtDef4 위모판,확증출상응적목적기인,측서정학후장MtDef4기인편단련접도대유GST표첨적원핵표체재체pGEX6P-1중,전화대장간균TransB (DE3),경IPTG유도,Glutathione Sepharose 4B친화순화,통과SDS-PAGE 전영급Western blot학정융합단백적표체.체외억균시험표명,MtDef4능구억제병원진균Corynespora cassiicola 이비Collectotrichum gloeosporioides적생장.본연구결과가위진일보배육전기인상효항병품충전정기출.
