医学研究生学报
醫學研究生學報
의학연구생학보
JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATE
2013年
7期
690-694
,共5页
弗里德赖希共济失调%启动子%Frataxin%HMX2%HMX3%EGR3
弗裏德賴希共濟失調%啟動子%Frataxin%HMX2%HMX3%EGR3
불리덕뢰희공제실조%계동자%Frataxin%HMX2%HMX3%EGR3
目的 弗里德赖希共济失调(Friedreich ataxia,FRDA)是一种常染色体隐性遗传疾病,其发病机制是frataxin(FXN)基因的第1个内含子上GAA序列的大量重复扩展,使FXN蛋白表达量减少所致.文中旨在研究FXN基因启动子区域上的转录因子对FXN表达的影响.方法 运用Genomatix软件预测出FXN基因的启动子区域及转录因子可能的结合位点,用基因定点突变技术克隆这些结合位点,并用双报告基因法检测启动子活性;qPCR、Western blot以及酶活性实验分别用于检测过表达转录因子后FXN表达量的变化及FXN在铁代谢中的功能.结果 启动子活性测定发现FXN基因的启动子1和启动子2活性较高,在该活性较高区域,预测出转录因子可能结合位点,并发现这些结合位点对启动子的活性很重要;过表达转录因子HMX2、HMX3和EGR3能促进细胞内源性FXN mRNA和蛋白的表达,并影响细胞内铁代谢水平.结论 转录因子HMX2,HMX3和EGR3能够促进FXN基因的表达,增强细胞铁代谢的能力和线粒体的功能.
目的 弗裏德賴希共濟失調(Friedreich ataxia,FRDA)是一種常染色體隱性遺傳疾病,其髮病機製是frataxin(FXN)基因的第1箇內含子上GAA序列的大量重複擴展,使FXN蛋白錶達量減少所緻.文中旨在研究FXN基因啟動子區域上的轉錄因子對FXN錶達的影響.方法 運用Genomatix軟件預測齣FXN基因的啟動子區域及轉錄因子可能的結閤位點,用基因定點突變技術剋隆這些結閤位點,併用雙報告基因法檢測啟動子活性;qPCR、Western blot以及酶活性實驗分彆用于檢測過錶達轉錄因子後FXN錶達量的變化及FXN在鐵代謝中的功能.結果 啟動子活性測定髮現FXN基因的啟動子1和啟動子2活性較高,在該活性較高區域,預測齣轉錄因子可能結閤位點,併髮現這些結閤位點對啟動子的活性很重要;過錶達轉錄因子HMX2、HMX3和EGR3能促進細胞內源性FXN mRNA和蛋白的錶達,併影響細胞內鐵代謝水平.結論 轉錄因子HMX2,HMX3和EGR3能夠促進FXN基因的錶達,增彊細胞鐵代謝的能力和線粒體的功能.
목적 불리덕뢰희공제실조(Friedreich ataxia,FRDA)시일충상염색체은성유전질병,기발병궤제시frataxin(FXN)기인적제1개내함자상GAA서렬적대량중복확전,사FXN단백표체량감소소치.문중지재연구FXN기인계동자구역상적전록인자대FXN표체적영향.방법 운용Genomatix연건예측출FXN기인적계동자구역급전록인자가능적결합위점,용기인정점돌변기술극륭저사결합위점,병용쌍보고기인법검측계동자활성;qPCR、Western blot이급매활성실험분별용우검측과표체전록인자후FXN표체량적변화급FXN재철대사중적공능.결과 계동자활성측정발현FXN기인적계동자1화계동자2활성교고,재해활성교고구역,예측출전록인자가능결합위점,병발현저사결합위점대계동자적활성흔중요;과표체전록인자HMX2、HMX3화EGR3능촉진세포내원성FXN mRNA화단백적표체,병영향세포내철대사수평.결론 전록인자HMX2,HMX3화EGR3능구촉진FXN기인적표체,증강세포철대사적능력화선립체적공능.
