南通大学学报（医学版）
南通大學學報（醫學版）
남통대학학보（의학판）
JOURNAL OF NANTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2013年
4期
246-250
,共5页
皮层神经元%酸敏感离子通道%蛋白激酶A%电流%钙离子
皮層神經元%痠敏感離子通道%蛋白激酶A%電流%鈣離子
피층신경원%산민감리자통도%단백격매A%전류%개리자
目的:探讨蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)对小鼠皮层神经元酸敏感离子通道(acid sensing ion channels,ASICs)功能的影响及机制.方法:取原代培养小鼠皮层神经元,通过应用钙影像、全细胞膜片钳、免疫荧光和Western Blot等技术,分别观察PKA 激动剂和抑制剂对ASICs 功能的影响及机制.结果:(1)在给予PKA 激动剂或抑制剂前神经元ASICs 电流幅值约为(224.2±17.59) pA(n=15),预孵育PKA 激动剂forskolin(10 μmol/L)使电流幅值减小为(108±14.67) pA(n=9),与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01),而预孵育PKA 抑制剂PKAI(5 μmol/L)则使电流幅值增加为(306.3±22.9) pA(n=12),与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);(2)在给予PKA 激动剂或抑制剂前,酸诱导的胞内钙△F/F值为(0.708±0.07)(n=20),PKA 激动剂forskolin(10 μmol/L)使其减少为(0.140±0.013)(n=17),与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01),PKA 抑制剂PKAI(5 μmol/L)使其增加为(0.978±0.108)(n=19),与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);(3)在加入forskolin 或PKAI 24 h 后,神经元ASIC1 总荧光密度无明显改变(P>0.05),但神经元ASIC1 膜荧光密度从对照组的(78.58±7.42)(n=32)减少到forskolin 孵育后的(31.41±3.38)(n=57),与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01),而PKAI 孵育后神经元ASIC1 膜荧光密度增加到(118.29±11.50)(n=34),与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01).结论:PKA 通过影响ASICs 膜分布负性调节小鼠皮层神经元ASICs 电流及由酸诱导的胞内钙增加.
目的:探討蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)對小鼠皮層神經元痠敏感離子通道(acid sensing ion channels,ASICs)功能的影響及機製.方法:取原代培養小鼠皮層神經元,通過應用鈣影像、全細胞膜片鉗、免疫熒光和Western Blot等技術,分彆觀察PKA 激動劑和抑製劑對ASICs 功能的影響及機製.結果:(1)在給予PKA 激動劑或抑製劑前神經元ASICs 電流幅值約為(224.2±17.59) pA(n=15),預孵育PKA 激動劑forskolin(10 μmol/L)使電流幅值減小為(108±14.67) pA(n=9),與對照組相比,差異有統計學意義(P<0.01),而預孵育PKA 抑製劑PKAI(5 μmol/L)則使電流幅值增加為(306.3±22.9) pA(n=12),與對照組相比,差異有統計學意義(P<0.01);(2)在給予PKA 激動劑或抑製劑前,痠誘導的胞內鈣△F/F值為(0.708±0.07)(n=20),PKA 激動劑forskolin(10 μmol/L)使其減少為(0.140±0.013)(n=17),與對照組相比,差異有統計學意義(P<0.01),PKA 抑製劑PKAI(5 μmol/L)使其增加為(0.978±0.108)(n=19),與對照組相比,差異有統計學意義(P<0.01);(3)在加入forskolin 或PKAI 24 h 後,神經元ASIC1 總熒光密度無明顯改變(P>0.05),但神經元ASIC1 膜熒光密度從對照組的(78.58±7.42)(n=32)減少到forskolin 孵育後的(31.41±3.38)(n=57),與對照組相比,差異有統計學意義(P<0.01),而PKAI 孵育後神經元ASIC1 膜熒光密度增加到(118.29±11.50)(n=34),與對照組相比,差異有統計學意義(P<0.01).結論:PKA 通過影響ASICs 膜分佈負性調節小鼠皮層神經元ASICs 電流及由痠誘導的胞內鈣增加.
목적:탐토단백격매A(protein kinase A,PKA)대소서피층신경원산민감리자통도(acid sensing ion channels,ASICs)공능적영향급궤제.방법:취원대배양소서피층신경원,통과응용개영상、전세포막편겸、면역형광화Western Blot등기술,분별관찰PKA 격동제화억제제대ASICs 공능적영향급궤제.결과:(1)재급여PKA 격동제혹억제제전신경원ASICs 전류폭치약위(224.2±17.59) pA(n=15),예부육PKA 격동제forskolin(10 μmol/L)사전류폭치감소위(108±14.67) pA(n=9),여대조조상비,차이유통계학의의(P<0.01),이예부육PKA 억제제PKAI(5 μmol/L)칙사전류폭치증가위(306.3±22.9) pA(n=12),여대조조상비,차이유통계학의의(P<0.01);(2)재급여PKA 격동제혹억제제전,산유도적포내개△F/F치위(0.708±0.07)(n=20),PKA 격동제forskolin(10 μmol/L)사기감소위(0.140±0.013)(n=17),여대조조상비,차이유통계학의의(P<0.01),PKA 억제제PKAI(5 μmol/L)사기증가위(0.978±0.108)(n=19),여대조조상비,차이유통계학의의(P<0.01);(3)재가입forskolin 혹PKAI 24 h 후,신경원ASIC1 총형광밀도무명현개변(P>0.05),단신경원ASIC1 막형광밀도종대조조적(78.58±7.42)(n=32)감소도forskolin 부육후적(31.41±3.38)(n=57),여대조조상비,차이유통계학의의(P<0.01),이PKAI 부육후신경원ASIC1 막형광밀도증가도(118.29±11.50)(n=34),여대조조상비,차이유통계학의의(P<0.01).결론:PKA 통과영향ASICs 막분포부성조절소서피층신경원ASICs 전류급유산유도적포내개증가.
