中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2013年
4期
491-497
,共7页
马越%余洋%贾岩岩%陈少锐%叶建涛%马韵子%李卓明%刘培庆
馬越%餘洋%賈巖巖%陳少銳%葉建濤%馬韻子%李卓明%劉培慶
마월%여양%가암암%진소예%협건도%마운자%리탁명%류배경
钙蛋白酶%心肌纤维化%血管紧张素Ⅱ
鈣蛋白酶%心肌纖維化%血管緊張素Ⅱ
개단백매%심기섬유화%혈관긴장소Ⅱ
calpain%myocardial fibrosis%angiotensin Ⅱ
[目的]研究钙蛋白酶在血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心肌纤维化中的作用及作用机制.[方法]原代培养SD大鼠心肌成纤维细胞(CF),取传代2-4代细胞,,预先给予不同浓度calpain抑制剂PD150616,观察对Ang Ⅱ诱导致纤维化模型的影响.实验分为空白对照组(control)、模型组(Ang Ⅱ)、低浓度给药组(Ang Ⅱ+ PD150616_5 μmol/L)、高浓度给药组(Ang Ⅱ+ PD150616_10 μmol/L).Edu检测CF增殖,Western blot检测纤维化因子纤连蛋白(FN)、结缔组织生长因子(CTGF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达,同时检测calpain激活的下游产物Cleaved α-Fodrin以及胞浆中p-IκB与细胞核内P65、NFAT4的蛋白水平变化.[结果]PD150616显著抑制由Ang Ⅱ诱导的CF增殖及FN、CTGF、α-SMA等纤维化因子表达上调.Ang Ⅱ显著提高Cleaved α-Fodrin的表达,PD150616可阻断Ang Ⅱ的作用,提示calpain受Ang Ⅱ激活,是Ang Ⅱ作用的下游因子.PD150616可抑制Ang Ⅱ引起的胞内IκB磷酸化和胞核中p65、NFAT4的表达上调,提示calpain的作用与NF-κB、NFAT4转位入核的信号通路相关.[结论]calpain在Ang Ⅱ刺激诱导心肌纤维化过程中发挥重要作用,其机制可能与NF-κB和NFAT信号通路的激活有关.
[目的]研究鈣蛋白酶在血管緊張素Ⅱ(Ang Ⅱ)誘導的心肌纖維化中的作用及作用機製.[方法]原代培養SD大鼠心肌成纖維細胞(CF),取傳代2-4代細胞,,預先給予不同濃度calpain抑製劑PD150616,觀察對Ang Ⅱ誘導緻纖維化模型的影響.實驗分為空白對照組(control)、模型組(Ang Ⅱ)、低濃度給藥組(Ang Ⅱ+ PD150616_5 μmol/L)、高濃度給藥組(Ang Ⅱ+ PD150616_10 μmol/L).Edu檢測CF增殖,Western blot檢測纖維化因子纖連蛋白(FN)、結締組織生長因子(CTGF)、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)蛋白錶達,同時檢測calpain激活的下遊產物Cleaved α-Fodrin以及胞漿中p-IκB與細胞覈內P65、NFAT4的蛋白水平變化.[結果]PD150616顯著抑製由Ang Ⅱ誘導的CF增殖及FN、CTGF、α-SMA等纖維化因子錶達上調.Ang Ⅱ顯著提高Cleaved α-Fodrin的錶達,PD150616可阻斷Ang Ⅱ的作用,提示calpain受Ang Ⅱ激活,是Ang Ⅱ作用的下遊因子.PD150616可抑製Ang Ⅱ引起的胞內IκB燐痠化和胞覈中p65、NFAT4的錶達上調,提示calpain的作用與NF-κB、NFAT4轉位入覈的信號通路相關.[結論]calpain在Ang Ⅱ刺激誘導心肌纖維化過程中髮揮重要作用,其機製可能與NF-κB和NFAT信號通路的激活有關.
[목적]연구개단백매재혈관긴장소Ⅱ(Ang Ⅱ)유도적심기섬유화중적작용급작용궤제.[방법]원대배양SD대서심기성섬유세포(CF),취전대2-4대세포,,예선급여불동농도calpain억제제PD150616,관찰대Ang Ⅱ유도치섬유화모형적영향.실험분위공백대조조(control)、모형조(Ang Ⅱ)、저농도급약조(Ang Ⅱ+ PD150616_5 μmol/L)、고농도급약조(Ang Ⅱ+ PD150616_10 μmol/L).Edu검측CF증식,Western blot검측섬유화인자섬련단백(FN)、결체조직생장인자(CTGF)、α-평활기기동단백(α-SMA)단백표체,동시검측calpain격활적하유산물Cleaved α-Fodrin이급포장중p-IκB여세포핵내P65、NFAT4적단백수평변화.[결과]PD150616현저억제유Ang Ⅱ유도적CF증식급FN、CTGF、α-SMA등섬유화인자표체상조.Ang Ⅱ현저제고Cleaved α-Fodrin적표체,PD150616가조단Ang Ⅱ적작용,제시calpain수Ang Ⅱ격활,시Ang Ⅱ작용적하유인자.PD150616가억제Ang Ⅱ인기적포내IκB린산화화포핵중p65、NFAT4적표체상조,제시calpain적작용여NF-κB、NFAT4전위입핵적신호통로상관.[결론]calpain재Ang Ⅱ자격유도심기섬유화과정중발휘중요작용,기궤제가능여NF-κB화NFAT신호통로적격활유관.
