河北医药
河北醫藥
하북의약
HEBEI MEDICAL JOURNAL
2013年
16期
2427-2429
,共3页
柳建强%刘海峰%李成林%高静%刘秉慈
柳建彊%劉海峰%李成林%高靜%劉秉慈
류건강%류해봉%리성림%고정%류병자
石英%细胞周期%Ku80%p53
石英%細胞週期%Ku80%p53
석영%세포주기%Ku80%p53
目的 探讨Ku80/p53通路在石英诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)细胞周期改变中的作用以及对p21、CyclinE、CDK2蛋白表达的影响.方法 采用RNAi技术分别建立抑制Ku80及p53蛋白表达的HELF细胞系(H-Ku80及H-p53).200 μg/ml石英处理阴性对照细胞系(H-NC)、H-Ku80及H-p53,采用流式细胞技术检测细胞周期,免疫印迹技术检测p21、CyclinE、CDK2蛋白的表达,并用Image-Proplus 6.0软件对条带光强度进行半定量分析.结果 石英刺激阴性对照细胞,G1期细胞所占比例由(83.53±2.24)%下降到(69.11±3.12)%;抑制Ku80表达后,石英诱导的G1期细胞的比例进一步减少,由(85.16±3.73)%下降到(59.92±3.31)%;抑制p53蛋白表达后,也同样显示石英诱导的G1期细胞比例进一步减少,由(73.02±1.43)%下降到(57.72±2.36)%,差异均有统计学意义(P＜0.05).石英刺激阴性对照细胞,p21、CyclinE、CDK2蛋白表达增高.抑制p53蛋白表达,可明显抑制石英诱导的p21蛋白表达增高,但是对CyclinE、CDK2蛋白的表达无影响.结论 Ku80/p53/p21信号通路负性调节石英诱导的细胞周期改变,石英诱导的CyclinE、CDK2的过表达是p53非依赖性的.
目的 探討Ku80/p53通路在石英誘導的人胚肺成纖維細胞(HELF)細胞週期改變中的作用以及對p21、CyclinE、CDK2蛋白錶達的影響.方法 採用RNAi技術分彆建立抑製Ku80及p53蛋白錶達的HELF細胞繫(H-Ku80及H-p53).200 μg/ml石英處理陰性對照細胞繫(H-NC)、H-Ku80及H-p53,採用流式細胞技術檢測細胞週期,免疫印跡技術檢測p21、CyclinE、CDK2蛋白的錶達,併用Image-Proplus 6.0軟件對條帶光彊度進行半定量分析.結果 石英刺激陰性對照細胞,G1期細胞所佔比例由(83.53±2.24)%下降到(69.11±3.12)%;抑製Ku80錶達後,石英誘導的G1期細胞的比例進一步減少,由(85.16±3.73)%下降到(59.92±3.31)%;抑製p53蛋白錶達後,也同樣顯示石英誘導的G1期細胞比例進一步減少,由(73.02±1.43)%下降到(57.72±2.36)%,差異均有統計學意義(P＜0.05).石英刺激陰性對照細胞,p21、CyclinE、CDK2蛋白錶達增高.抑製p53蛋白錶達,可明顯抑製石英誘導的p21蛋白錶達增高,但是對CyclinE、CDK2蛋白的錶達無影響.結論 Ku80/p53/p21信號通路負性調節石英誘導的細胞週期改變,石英誘導的CyclinE、CDK2的過錶達是p53非依賴性的.
목적 탐토Ku80/p53통로재석영유도적인배폐성섬유세포(HELF)세포주기개변중적작용이급대p21、CyclinE、CDK2단백표체적영향.방법 채용RNAi기술분별건립억제Ku80급p53단백표체적HELF세포계(H-Ku80급H-p53).200 μg/ml석영처리음성대조세포계(H-NC)、H-Ku80급H-p53,채용류식세포기술검측세포주기,면역인적기술검측p21、CyclinE、CDK2단백적표체,병용Image-Proplus 6.0연건대조대광강도진행반정량분석.결과 석영자격음성대조세포,G1기세포소점비례유(83.53±2.24)%하강도(69.11±3.12)%;억제Ku80표체후,석영유도적G1기세포적비례진일보감소,유(85.16±3.73)%하강도(59.92±3.31)%;억제p53단백표체후,야동양현시석영유도적G1기세포비례진일보감소,유(73.02±1.43)%하강도(57.72±2.36)%,차이균유통계학의의(P＜0.05).석영자격음성대조세포,p21、CyclinE、CDK2단백표체증고.억제p53단백표체,가명현억제석영유도적p21단백표체증고,단시대CyclinE、CDK2단백적표체무영향.결론 Ku80/p53/p21신호통로부성조절석영유도적세포주기개변,석영유도적CyclinE、CDK2적과표체시p53비의뢰성적.
