沈阳农业大学学报
瀋暘農業大學學報
침양농업대학학보
JOURNAL OF SHENYANG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2013年
2期
143-147
,共5页
王学斌%司龙亭%孟茜%李坤
王學斌%司龍亭%孟茜%李坤
왕학빈%사룡정%맹천%리곤
黄瓜%根癌农杆菌%遗传转化%优化%转化酶抑制子
黃瓜%根癌農桿菌%遺傳轉化%優化%轉化酶抑製子
황과%근암농간균%유전전화%우화%전화매억제자
cucumber%Agrobacterium tumefaciens%genetic transformation%optimization%INT
选用再生能力较强的黄瓜自交系M8为试验材料,在再生体系建立的基础之上,采用根癌农杆菌介导法将转化酶抑制子基因转入黄瓜中.将农杆菌菌液浸泡过的子叶节分别接种在浓度梯度为1 mg· L-1到10 mg·L-1的选择培养基上,研究子叶节对潮霉素的耐受性和敏感度.使用农杆菌菌液浸泡5,10,15,20min,分别接种到筛选培养基上,研究浸泡时间对转化效率的影响.结果表明:HygB的选择压浓度为6mg· L-1,侵染时间为15min时,再生频率最高,为18.9％.经PCR检测表明转化酶抑制子基因已经整合到黄瓜基因组中,转化率为2.0％.
選用再生能力較彊的黃瓜自交繫M8為試驗材料,在再生體繫建立的基礎之上,採用根癌農桿菌介導法將轉化酶抑製子基因轉入黃瓜中.將農桿菌菌液浸泡過的子葉節分彆接種在濃度梯度為1 mg· L-1到10 mg·L-1的選擇培養基上,研究子葉節對潮黴素的耐受性和敏感度.使用農桿菌菌液浸泡5,10,15,20min,分彆接種到篩選培養基上,研究浸泡時間對轉化效率的影響.結果錶明:HygB的選擇壓濃度為6mg· L-1,侵染時間為15min時,再生頻率最高,為18.9％.經PCR檢測錶明轉化酶抑製子基因已經整閤到黃瓜基因組中,轉化率為2.0％.
선용재생능력교강적황과자교계M8위시험재료,재재생체계건립적기출지상,채용근암농간균개도법장전화매억제자기인전입황과중.장농간균균액침포과적자협절분별접충재농도제도위1 mg· L-1도10 mg·L-1적선택배양기상,연구자협절대조매소적내수성화민감도.사용농간균균액침포5,10,15,20min,분별접충도사선배양기상,연구침포시간대전화효솔적영향.결과표명:HygB적선택압농도위6mg· L-1,침염시간위15min시,재생빈솔최고,위18.9％.경PCR검측표명전화매억제자기인이경정합도황과기인조중,전화솔위2.0％.
