厦门大学学报（自然科学版）
廈門大學學報（自然科學版）
하문대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2013年
4期
525-530
,共6页
陈莎%张翔%张舒越%陈超翔%颜晓梅
陳莎%張翔%張舒越%陳超翔%顏曉梅
진사%장상%장서월%진초상%안효매
线粒体%超氧阴离子%线粒体膜电位%超高灵敏流式检测%抗霉素A
線粒體%超氧陰離子%線粒體膜電位%超高靈敏流式檢測%抗黴素A
선립체%초양음리자%선립체막전위%초고령민류식검측%항매소A
mitochondrion%superoxide anion%mitochondrial membrane potential (MMP)%high sensitivity flow cytometer (HSF-CM)%antimycin A
建立了抗霉素A直接刺激提纯线粒体所引起的超氧阴离子(O2-·)含量和膜电位变化的单线粒体水平快速测定方法.利用杜恩斯(Dounce)匀浆装置,结合差速离心法,从HeLa细胞中提纯线粒体,经抗霉素A刺激和特异性荧光探针染色后,采用实验室自行研制的超高灵敏流式检测装置对线粒体进行快速、灵敏地逐一检测.与此同时,利用传统流式细胞仪在细胞水平对抗霉素A刺激所引起的O2-·含量和线粒体膜电位的变化进行了测定.实验结果表明,抗霉素A直接刺激线粒体能引起O2-·含量增加36 ％,膜电位下降16％;而抗霉素A在细胞水平能使得细胞中O2-·含量增加约3倍,膜电位的荧光信号增加1倍.研究结果表明,抗霉素A能直接诱导线粒体产生O2-·并引起膜电位的小幅度下降,所建立的线粒体活性参数微弱信号检测的新方法将有助于更深入地了解线粒体的功能以及药物的作用机理.
建立瞭抗黴素A直接刺激提純線粒體所引起的超氧陰離子(O2-·)含量和膜電位變化的單線粒體水平快速測定方法.利用杜恩斯(Dounce)勻漿裝置,結閤差速離心法,從HeLa細胞中提純線粒體,經抗黴素A刺激和特異性熒光探針染色後,採用實驗室自行研製的超高靈敏流式檢測裝置對線粒體進行快速、靈敏地逐一檢測.與此同時,利用傳統流式細胞儀在細胞水平對抗黴素A刺激所引起的O2-·含量和線粒體膜電位的變化進行瞭測定.實驗結果錶明,抗黴素A直接刺激線粒體能引起O2-·含量增加36 ％,膜電位下降16％;而抗黴素A在細胞水平能使得細胞中O2-·含量增加約3倍,膜電位的熒光信號增加1倍.研究結果錶明,抗黴素A能直接誘導線粒體產生O2-·併引起膜電位的小幅度下降,所建立的線粒體活性參數微弱信號檢測的新方法將有助于更深入地瞭解線粒體的功能以及藥物的作用機理.
건립료항매소A직접자격제순선립체소인기적초양음리자(O2-·)함량화막전위변화적단선립체수평쾌속측정방법.이용두은사(Dounce)균장장치,결합차속리심법,종HeLa세포중제순선립체,경항매소A자격화특이성형광탐침염색후,채용실험실자행연제적초고령민류식검측장치대선립체진행쾌속、령민지축일검측.여차동시,이용전통류식세포의재세포수평대항매소A자격소인기적O2-·함량화선립체막전위적변화진행료측정.실험결과표명,항매소A직접자격선립체능인기O2-·함량증가36 ％,막전위하강16％;이항매소A재세포수평능사득세포중O2-·함량증가약3배,막전위적형광신호증가1배.연구결과표명,항매소A능직접유도선립체산생O2-·병인기막전위적소폭도하강,소건립적선립체활성삼수미약신호검측적신방법장유조우경심입지료해선립체적공능이급약물적작용궤리.
