林业科技开发
林業科技開髮
임업과기개발
CHINA FORESTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY
2013年
4期
75-79
,共5页
伍艳芳%徐海宁%江香梅%温强%熊振宇
伍豔芳%徐海寧%江香梅%溫彊%熊振宇
오염방%서해저%강향매%온강%웅진우
樟树%化学类型%RNA提取%CTAB法%RT-PCR
樟樹%化學類型%RNA提取%CTAB法%RT-PCR
장수%화학류형%RNA제취%CTAB법%RT-PCR
Cinnamomum camphora%chemotypys%RNA extraction%improved CTAB method%RT-PCR
采用SDS/酸酚法、Trizol试剂法、常规CTAB法及改良的CTAB法,分别提取5种化学类型樟树叶片总RNA,并对提取效果进行了比较分析.结果表明:Trizol法难以提取樟树叶片总RNA,得率很低；SDS/酸酚法和常规CTAB法得到的RNA存在DNA污染,富含蛋白、多糖、多酚等杂质；这3种方法均不适于富含多糖多酚类物质的樟树叶片总RNA的提取.改良的CTAB法能够提取得到樟树5种化学类型叶片总RNA,且在操作过程中,异樟比油樟和脑樟更易提取.此法能有效去除多糖和蛋白,提取得到的RNA 28S和18S rRNA条带清晰,OD260/OD280值为2.0左右,平均产率分别为115.8 μg/g FW.经RT-PCR检测,所得总RNA质量高、完整性好、成功率高,可以满足下一步实验的要求,可作为樟树叶片总RNA提取的首选方法.
採用SDS/痠酚法、Trizol試劑法、常規CTAB法及改良的CTAB法,分彆提取5種化學類型樟樹葉片總RNA,併對提取效果進行瞭比較分析.結果錶明:Trizol法難以提取樟樹葉片總RNA,得率很低；SDS/痠酚法和常規CTAB法得到的RNA存在DNA汙染,富含蛋白、多糖、多酚等雜質；這3種方法均不適于富含多糖多酚類物質的樟樹葉片總RNA的提取.改良的CTAB法能夠提取得到樟樹5種化學類型葉片總RNA,且在操作過程中,異樟比油樟和腦樟更易提取.此法能有效去除多糖和蛋白,提取得到的RNA 28S和18S rRNA條帶清晰,OD260/OD280值為2.0左右,平均產率分彆為115.8 μg/g FW.經RT-PCR檢測,所得總RNA質量高、完整性好、成功率高,可以滿足下一步實驗的要求,可作為樟樹葉片總RNA提取的首選方法.
채용SDS/산분법、Trizol시제법、상규CTAB법급개량적CTAB법,분별제취5충화학류형장수협편총RNA,병대제취효과진행료비교분석.결과표명:Trizol법난이제취장수협편총RNA,득솔흔저；SDS/산분법화상규CTAB법득도적RNA존재DNA오염,부함단백、다당、다분등잡질；저3충방법균불괄우부함다당다분류물질적장수협편총RNA적제취.개량적CTAB법능구제취득도장수5충화학류형협편총RNA,차재조작과정중,이장비유장화뇌장경역제취.차법능유효거제다당화단백,제취득도적RNA 28S화18S rRNA조대청석,OD260/OD280치위2.0좌우,평균산솔분별위115.8 μg/g FW.경RT-PCR검측,소득총RNA질량고、완정성호、성공솔고,가이만족하일보실험적요구,가작위장수협편총RNA제취적수선방법.
