干旱胁迫下柠条锦鸡儿叶片SSH文库构建及CkWRKY1基因克隆
간한협박하저조금계인협편SSH문고구건급CkWRKY1기인극륭
Construction of a Suppression Subtractive Hybridization Library of Caragana korshinskii Under Drought Stress and Cloning of CkWRKY1 Gene
  • 万方数据
    林业科学 임업과학
    SCIENTIA SILVAE SINICAE
    2013年 7期 62-68 ,共7页

    杨杞%张涛%王颖%李高%尹佳佳%韩晓敏%齐力旺%李国婧%王瑞刚

    양기%장도%왕영%리고%윤가가%한효민%제력왕%리국청%왕서강

    柠条锦鸡儿%干旱胁迫%抑制性差减杂交(SSH)文库%WRKY%基因克隆 檸條錦鷄兒%榦旱脅迫%抑製性差減雜交(SSH)文庫%WRKY%基因剋隆
    저조금계인%간한협박%억제성차감잡교(SSH)문고%WRKY%기인극륭
    Caragana korshinskii%drought stress%suppression subtractive hybridization (SSH) library%WRKY%gene cloning
    为研究柠条锦鸡儿抗旱的分子机制,挖掘干旱响应相关基因,成功构建干旱胁迫下柠条锦鸡儿叶片的抑制性差减杂交(SSH)文库,获得1 286条高质量的EST序列,平均长度475 bp,拼接得到Unigenes 645条.对这些Unigenes进行Blast比对注释后发现很多抗旱相关基因,例如LEA蛋白、DHN蛋白编码基因,MYB、bZIP、WRKY、NAC和bHLH转录因子等.通过RACE技术克隆其中1个WRKY转录因子的cDNA全长,命名为CkWRKYI,GenBank登录号为JX987095.CkWRKY1编码330个氨基酸的蛋白质,氨基酸序列中有1个“WRKYGQK”的WRKY转录因子家族保守序列,属于第Ⅱ类WRKY转录因子.利用实时荧光定量PCR技术检测发现,CkWRKY1基因在干旱处理后mRNA的表达水平明显上升,预示该转录因子可能与柠条锦鸡儿抗旱的分子机制相关.
    위연구저조금계인항한적분자궤제,알굴간한향응상관기인,성공구건간한협박하저조금계인협편적억제성차감잡교(SSH)문고,획득1 286조고질량적EST서렬,평균장도475 bp,병접득도Unigenes 645조.대저사Unigenes진행Blast비대주석후발현흔다항한상관기인,례여LEA단백、DHN단백편마기인,MYB、bZIP、WRKY、NAC화bHLH전록인자등.통과RACE기술극륭기중1개WRKY전록인자적cDNA전장,명명위CkWRKYI,GenBank등록호위JX987095.CkWRKY1편마330개안기산적단백질,안기산서렬중유1개“WRKYGQK”적WRKY전록인자가족보수서렬,속우제Ⅱ류WRKY전록인자.이용실시형광정량PCR기술검측발현,CkWRKY1기인재간한처리후mRNA적표체수평명현상승,예시해전록인자가능여저조금계인항한적분자궤제상관.
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