医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2013年
8期
91-94
,共4页
环介导恒温扩增%空肠弯曲菌%DNA染料%钙黄绿素%快速检验
環介導恆溫擴增%空腸彎麯菌%DNA染料%鈣黃綠素%快速檢驗
배개도항온확증%공장만곡균%DNA염료%개황록소%쾌속검험
Loop-mediated isothermal amplification (LAMP)%Campylobacter jejuni%DNA dye%Calcein%Rapid detection
目的 利用环介导恒温扩增技术,以空肠弯曲菌的VS1基因设计引物,建立快速检测空肠弯曲菌的方法,以期能应用于急性腹泻和肠炎等疾病的快速检验.方法 ①通过基因比对与引物设计,设计针对空肠弯曲菌的环介导恒温扩增检测(LAMP)方法；②用钙黄绿素、亚甲基蓝、结晶紫、溴化乙锭4种DNA染料对扩增产物进行染色,评价各染料染色效果；③检测该LAMP方法对空肠弯曲菌及其他干扰菌的扩增情况,评价其特异性；④将该LAMP方法与培养法比较,进行统计学分析.结果 ①设计出针对空肠弯曲菌的LAMP检测方法；②钙黄绿素与扩增产物结合后颜色变化明显,是该LAMP方法中较好的DNA染料物质；③本LAMP检测方法只针对空肠弯曲菌有扩增,对其他干扰菌不扩增,显示出良好的特异性；④试验共检测了60株临床和标准菌株,对于菌株的培养物,LAMP检测结果与培养鉴定法比较差异无统计学意义(x2 =0.3333,P＞0.05).结论 本试验设计出了针对空肠弯曲菌LAMP检测方法,该LAMP法较好的DNA染料物质是钙黄绿素,该方法具有良好的特异性,与培养鉴定法比较具有较高的阳性、阴性及总体符合率,能够用于空肠弯曲菌的快速检验.
目的 利用環介導恆溫擴增技術,以空腸彎麯菌的VS1基因設計引物,建立快速檢測空腸彎麯菌的方法,以期能應用于急性腹瀉和腸炎等疾病的快速檢驗.方法 ①通過基因比對與引物設計,設計針對空腸彎麯菌的環介導恆溫擴增檢測(LAMP)方法；②用鈣黃綠素、亞甲基藍、結晶紫、溴化乙錠4種DNA染料對擴增產物進行染色,評價各染料染色效果；③檢測該LAMP方法對空腸彎麯菌及其他榦擾菌的擴增情況,評價其特異性；④將該LAMP方法與培養法比較,進行統計學分析.結果 ①設計齣針對空腸彎麯菌的LAMP檢測方法；②鈣黃綠素與擴增產物結閤後顏色變化明顯,是該LAMP方法中較好的DNA染料物質；③本LAMP檢測方法隻針對空腸彎麯菌有擴增,對其他榦擾菌不擴增,顯示齣良好的特異性；④試驗共檢測瞭60株臨床和標準菌株,對于菌株的培養物,LAMP檢測結果與培養鑒定法比較差異無統計學意義(x2 =0.3333,P＞0.05).結論 本試驗設計齣瞭針對空腸彎麯菌LAMP檢測方法,該LAMP法較好的DNA染料物質是鈣黃綠素,該方法具有良好的特異性,與培養鑒定法比較具有較高的暘性、陰性及總體符閤率,能夠用于空腸彎麯菌的快速檢驗.
목적 이용배개도항온확증기술,이공장만곡균적VS1기인설계인물,건립쾌속검측공장만곡균적방법,이기능응용우급성복사화장염등질병적쾌속검험.방법 ①통과기인비대여인물설계,설계침대공장만곡균적배개도항온확증검측(LAMP)방법；②용개황록소、아갑기람、결정자、추화을정4충DNA염료대확증산물진행염색,평개각염료염색효과；③검측해LAMP방법대공장만곡균급기타간우균적확증정황,평개기특이성；④장해LAMP방법여배양법비교,진행통계학분석.결과 ①설계출침대공장만곡균적LAMP검측방법；②개황록소여확증산물결합후안색변화명현,시해LAMP방법중교호적DNA염료물질；③본LAMP검측방법지침대공장만곡균유확증,대기타간우균불확증,현시출량호적특이성；④시험공검측료60주림상화표준균주,대우균주적배양물,LAMP검측결과여배양감정법비교차이무통계학의의(x2 =0.3333,P＞0.05).결론 본시험설계출료침대공장만곡균LAMP검측방법,해LAMP법교호적DNA염료물질시개황록소,해방법구유량호적특이성,여배양감정법비교구유교고적양성、음성급총체부합솔,능구용우공장만곡균적쾌속검험.
