山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2013年
23期
1-5
,共5页
洪英洽%包继明%李炬聪%袁平庆%罗海华%赵善超%姜勇
洪英洽%包繼明%李炬聰%袁平慶%囉海華%趙善超%薑勇
홍영흡%포계명%리거총%원평경%라해화%조선초%강용
晚期糖基化终产物受体%缺失体%真核表达载体%前列腺癌
晚期糖基化終產物受體%缺失體%真覈錶達載體%前列腺癌
만기당기화종산물수체%결실체%진핵표체재체%전렬선암
receptor for advanced glycation end products%deletions%eukaryotic expression vectors%prostatic carcinoma
目的 构建带HA标签的晚期糖基化终产物受体(RAGE)不同功能段缺失体真核细胞表达载体,使其在前列腺癌细胞株PC-3中过表达并观察其定位.方法 采用PCR方法扩增缺失不同功能段V/VC1的RAGE缺失体△V/△VC1序列,利用分子克隆技术将其重组于pcDNA3-HA载体中,利用PCR和测序鉴定克隆正确性;转染PC-3细胞,用Western blot法检测其表达,免疫荧光法检测其在细胞中的定位.结果 RAGE不同缺失体质粒经测序鉴定无误,并可在PC-3细胞中高表达,且经免疫荧光检测其主要在细胞质中表达.结论 成功构建了RAGE不同缺失体的真核表达载体,转染PC-3细胞后呈高表达,其在PC-3细胞中主要定位于细胞质.
目的 構建帶HA標籤的晚期糖基化終產物受體(RAGE)不同功能段缺失體真覈細胞錶達載體,使其在前列腺癌細胞株PC-3中過錶達併觀察其定位.方法 採用PCR方法擴增缺失不同功能段V/VC1的RAGE缺失體△V/△VC1序列,利用分子剋隆技術將其重組于pcDNA3-HA載體中,利用PCR和測序鑒定剋隆正確性;轉染PC-3細胞,用Western blot法檢測其錶達,免疫熒光法檢測其在細胞中的定位.結果 RAGE不同缺失體質粒經測序鑒定無誤,併可在PC-3細胞中高錶達,且經免疫熒光檢測其主要在細胞質中錶達.結論 成功構建瞭RAGE不同缺失體的真覈錶達載體,轉染PC-3細胞後呈高錶達,其在PC-3細胞中主要定位于細胞質.
목적 구건대HA표첨적만기당기화종산물수체(RAGE)불동공능단결실체진핵세포표체재체,사기재전렬선암세포주PC-3중과표체병관찰기정위.방법 채용PCR방법확증결실불동공능단V/VC1적RAGE결실체△V/△VC1서렬,이용분자극륭기술장기중조우pcDNA3-HA재체중,이용PCR화측서감정극륭정학성;전염PC-3세포,용Western blot법검측기표체,면역형광법검측기재세포중적정위.결과 RAGE불동결실체질립경측서감정무오,병가재PC-3세포중고표체,차경면역형광검측기주요재세포질중표체.결론 성공구건료RAGE불동결실체적진핵표체재체,전염PC-3세포후정고표체,기재PC-3세포중주요정위우세포질.
