癌症
癌癥
암증
CHINESE JOURNAL OF CANCER
2009年
10期
1067-1071
,共5页
邓勇军%张兰军%苏晓东%张冬坤%戎铁华%王其京%夏建川
鄧勇軍%張蘭軍%囌曉東%張鼕坤%戎鐵華%王其京%夏建川
산용군%장란군%소효동%장동곤%융철화%왕기경%하건천
食管肿瘤%树突细胞%融合疫苗%移植瘤%细胞毒性T细胞
食管腫瘤%樹突細胞%融閤疫苗%移植瘤%細胞毒性T細胞
식관종류%수돌세포%융합역묘%이식류%세포독성T세포
背景与目的:我们前期的研究表明树突细胞/肿瘤细胞融合疫苗能有效诱导体外抗食管癌细胞的特异性免疫应答,在此基础上,本研究进一步探讨树突细胞/肿瘤细胞融合疫苗诱导抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)对食管癌细胞株EC-109裸鼠皮下移植瘤的体内抑瘤作用及对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响.方法:①采用聚乙二醇法制备树突细胞/肿瘤细胞融合疫苗并诱导抗原特异性CTL8产生.②建立食管癌EC-109细胞裸鼠皮下移植瘤模型,将成功荷瘤的裸鼠随机分为3组.分别以融合细胞激活的CTLs(A组,n=11)、未激活的T淋巴细胞(B组,n=11)以及RMPI=1640培养液(C组,n=11)作为效应细胞进行瘤内注射,每周一次.③4周后处死动物剥离肿瘤组织,测量并比较各组肿瘤组织的平均体积及平均湿重,计算抑瘤率.④免疫组化SP法检测3组裸鼠移植瘤增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达.⑤流式细胞仪检测3组肿瘤细胞周期及细胞凋亡率,比较各组肿瘤细胞的S期细胞平均百分比(S-phase fraction,SPF)以及细胞平均凋亡率.结果:①A组肿瘤组织的平均体积显著小于B组和C组,差异有统计学意义[(881.45±31.14)mm3 vs.(1493.37±51.67)mm3,(2065.77±87.55)mm3,F=950.67,P=0.00],其平均湿重亦显著小于B组和C组,差异有统计学意义[(0.88±0.04)g vs.(1.38±0.07)g,(2.04±0.11)g,F=1335.90,P=0.00];A组抑瘤率明显高于B组,差异有统计学意义(56.86% vs.32.35%,F=1218.08,P=0.001).②A组肿瘤的平均PCNA-LI明显低于B组和C组,差异有统计学意义[(26.83±0.95)% vs.(51.82±1.51)%,(68.93±2.40)%,F=1528.39,P=0.000].③A组肿瘤细胞平均SPF值明显低于B、C两组,差异有统计学意义[(12.46±0.36)% vs.(29.39±0.96)%,(42.25±1.43)%,F=2188.05,P=0.001].④A组肿瘤细胞平均凋亡率明显高于B、C两组,差异有统计学意义[(38.03±1.21)% vs.(17.75±0.56)%,(6.59±0.22)%,F=4565.51,P=0.001].结论:本研究成功建立人食管癌EC-109细胞裸鼠皮下移植瘤模型,证实DC/EC-109细胞融合疫苗体外诱导的抗原特异性CTLs瘤内直接注射具有抑制食管癌裸鼠移植瘤生长的作用,其机制可能是通过抑制肿瘤细胞增殖及诱导肿瘤细胞凋亡发挥其抗肿瘤作用.
揹景與目的:我們前期的研究錶明樹突細胞/腫瘤細胞融閤疫苗能有效誘導體外抗食管癌細胞的特異性免疫應答,在此基礎上,本研究進一步探討樹突細胞/腫瘤細胞融閤疫苗誘導抗原特異性細胞毒性T淋巴細胞(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)對食管癌細胞株EC-109裸鼠皮下移植瘤的體內抑瘤作用及對腫瘤細胞增殖和凋亡的影響.方法:①採用聚乙二醇法製備樹突細胞/腫瘤細胞融閤疫苗併誘導抗原特異性CTL8產生.②建立食管癌EC-109細胞裸鼠皮下移植瘤模型,將成功荷瘤的裸鼠隨機分為3組.分彆以融閤細胞激活的CTLs(A組,n=11)、未激活的T淋巴細胞(B組,n=11)以及RMPI=1640培養液(C組,n=11)作為效應細胞進行瘤內註射,每週一次.③4週後處死動物剝離腫瘤組織,測量併比較各組腫瘤組織的平均體積及平均濕重,計算抑瘤率.④免疫組化SP法檢測3組裸鼠移植瘤增殖細胞覈抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的錶達.⑤流式細胞儀檢測3組腫瘤細胞週期及細胞凋亡率,比較各組腫瘤細胞的S期細胞平均百分比(S-phase fraction,SPF)以及細胞平均凋亡率.結果:①A組腫瘤組織的平均體積顯著小于B組和C組,差異有統計學意義[(881.45±31.14)mm3 vs.(1493.37±51.67)mm3,(2065.77±87.55)mm3,F=950.67,P=0.00],其平均濕重亦顯著小于B組和C組,差異有統計學意義[(0.88±0.04)g vs.(1.38±0.07)g,(2.04±0.11)g,F=1335.90,P=0.00];A組抑瘤率明顯高于B組,差異有統計學意義(56.86% vs.32.35%,F=1218.08,P=0.001).②A組腫瘤的平均PCNA-LI明顯低于B組和C組,差異有統計學意義[(26.83±0.95)% vs.(51.82±1.51)%,(68.93±2.40)%,F=1528.39,P=0.000].③A組腫瘤細胞平均SPF值明顯低于B、C兩組,差異有統計學意義[(12.46±0.36)% vs.(29.39±0.96)%,(42.25±1.43)%,F=2188.05,P=0.001].④A組腫瘤細胞平均凋亡率明顯高于B、C兩組,差異有統計學意義[(38.03±1.21)% vs.(17.75±0.56)%,(6.59±0.22)%,F=4565.51,P=0.001].結論:本研究成功建立人食管癌EC-109細胞裸鼠皮下移植瘤模型,證實DC/EC-109細胞融閤疫苗體外誘導的抗原特異性CTLs瘤內直接註射具有抑製食管癌裸鼠移植瘤生長的作用,其機製可能是通過抑製腫瘤細胞增殖及誘導腫瘤細胞凋亡髮揮其抗腫瘤作用.
배경여목적:아문전기적연구표명수돌세포/종류세포융합역묘능유효유도체외항식관암세포적특이성면역응답,재차기출상,본연구진일보탐토수돌세포/종류세포융합역묘유도항원특이성세포독성T림파세포(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)대식관암세포주EC-109라서피하이식류적체내억류작용급대종류세포증식화조망적영향.방법:①채용취을이순법제비수돌세포/종류세포융합역묘병유도항원특이성CTL8산생.②건립식관암EC-109세포라서피하이식류모형,장성공하류적라서수궤분위3조.분별이융합세포격활적CTLs(A조,n=11)、미격활적T림파세포(B조,n=11)이급RMPI=1640배양액(C조,n=11)작위효응세포진행류내주사,매주일차.③4주후처사동물박리종류조직,측량병비교각조종류조직적평균체적급평균습중,계산억류솔.④면역조화SP법검측3조라서이식류증식세포핵항원(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)적표체.⑤류식세포의검측3조종류세포주기급세포조망솔,비교각조종류세포적S기세포평균백분비(S-phase fraction,SPF)이급세포평균조망솔.결과:①A조종류조직적평균체적현저소우B조화C조,차이유통계학의의[(881.45±31.14)mm3 vs.(1493.37±51.67)mm3,(2065.77±87.55)mm3,F=950.67,P=0.00],기평균습중역현저소우B조화C조,차이유통계학의의[(0.88±0.04)g vs.(1.38±0.07)g,(2.04±0.11)g,F=1335.90,P=0.00];A조억류솔명현고우B조,차이유통계학의의(56.86% vs.32.35%,F=1218.08,P=0.001).②A조종류적평균PCNA-LI명현저우B조화C조,차이유통계학의의[(26.83±0.95)% vs.(51.82±1.51)%,(68.93±2.40)%,F=1528.39,P=0.000].③A조종류세포평균SPF치명현저우B、C량조,차이유통계학의의[(12.46±0.36)% vs.(29.39±0.96)%,(42.25±1.43)%,F=2188.05,P=0.001].④A조종류세포평균조망솔명현고우B、C량조,차이유통계학의의[(38.03±1.21)% vs.(17.75±0.56)%,(6.59±0.22)%,F=4565.51,P=0.001].결론:본연구성공건립인식관암EC-109세포라서피하이식류모형,증실DC/EC-109세포융합역묘체외유도적항원특이성CTLs류내직접주사구유억제식관암라서이식류생장적작용,기궤제가능시통과억제종류세포증식급유도종류세포조망발휘기항종류작용.
