临床神经病学杂志
臨床神經病學雜誌
림상신경병학잡지
JOURNAL OF CLINICAL NEUROLOGY
2012年
6期
440-442
,共3页
骨髓间充质干细胞%分化%神经元样细胞
骨髓間充質榦細胞%分化%神經元樣細胞
골수간충질간세포%분화%신경원양세포
目的 探讨多种诱导剂联合对大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)体外向神经元样细胞分化的影响.方法 从Wistar大鼠骨髓中分离rMSCs并进行体外培养,经免疫荧光染色及流式细胞仪行CD44、CD45和CD90鉴定后,将传第3代的rMSCs用DMEM、0.1 mmol/L β-巯基乙醇(BME)和2%二甲基亚砜(DMSO)预诱导5h后,给予10μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、10 μg/L表皮生长因子(EGF)、10 μg/L肌酸联合诱导7d.应用荧光相差显微镜观察细胞形态,免疫荧光染色和流式细胞仪对神经元标志物进行鉴定.结果 诱导后约80% rMSCs呈神经元样改变,神经元标志物阳性率分别是巢蛋白为(42.14±2.85)%、神经细丝蛋白为(17.13±1.03)%、β-微管蛋白-Ⅲ为(20.42±1.98)%、胶质纤维酸性蛋白为(39.97±2.34)%、微管结合蛋白-2为(39.30±1.72)%、胆碱乙酰转移酶为(21.30±1.83)%.结论 多种诱导剂(BME、DMSO、bFGF、EGF和肌酸)联合可诱导约80% rMSCs向神经元样细胞分化.
目的 探討多種誘導劑聯閤對大鼠骨髓間充質榦細胞(rMSCs)體外嚮神經元樣細胞分化的影響.方法 從Wistar大鼠骨髓中分離rMSCs併進行體外培養,經免疫熒光染色及流式細胞儀行CD44、CD45和CD90鑒定後,將傳第3代的rMSCs用DMEM、0.1 mmol/L β-巰基乙醇(BME)和2%二甲基亞砜(DMSO)預誘導5h後,給予10μg/L堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)、10 μg/L錶皮生長因子(EGF)、10 μg/L肌痠聯閤誘導7d.應用熒光相差顯微鏡觀察細胞形態,免疫熒光染色和流式細胞儀對神經元標誌物進行鑒定.結果 誘導後約80% rMSCs呈神經元樣改變,神經元標誌物暘性率分彆是巢蛋白為(42.14±2.85)%、神經細絲蛋白為(17.13±1.03)%、β-微管蛋白-Ⅲ為(20.42±1.98)%、膠質纖維痠性蛋白為(39.97±2.34)%、微管結閤蛋白-2為(39.30±1.72)%、膽堿乙酰轉移酶為(21.30±1.83)%.結論 多種誘導劑(BME、DMSO、bFGF、EGF和肌痠)聯閤可誘導約80% rMSCs嚮神經元樣細胞分化.
목적 탐토다충유도제연합대대서골수간충질간세포(rMSCs)체외향신경원양세포분화적영향.방법 종Wistar대서골수중분리rMSCs병진행체외배양,경면역형광염색급류식세포의행CD44、CD45화CD90감정후,장전제3대적rMSCs용DMEM、0.1 mmol/L β-구기을순(BME)화2%이갑기아풍(DMSO)예유도5h후,급여10μg/L감성성섬유세포생장인자(bFGF)、10 μg/L표피생장인자(EGF)、10 μg/L기산연합유도7d.응용형광상차현미경관찰세포형태,면역형광염색화류식세포의대신경원표지물진행감정.결과 유도후약80% rMSCs정신경원양개변,신경원표지물양성솔분별시소단백위(42.14±2.85)%、신경세사단백위(17.13±1.03)%、β-미관단백-Ⅲ위(20.42±1.98)%、효질섬유산성단백위(39.97±2.34)%、미관결합단백-2위(39.30±1.72)%、담감을선전이매위(21.30±1.83)%.결론 다충유도제(BME、DMSO、bFGF、EGF화기산)연합가유도약80% rMSCs향신경원양세포분화.