福建果树
福建果樹
복건과수
FUJIAN FRUITS
2013年
1期
19-23
,共5页
姜翠翠%卢新坤%方智振%郭有枝%姜业先%刘献勇%叶新福
薑翠翠%盧新坤%方智振%郭有枝%薑業先%劉獻勇%葉新福
강취취%로신곤%방지진%곽유지%강업선%류헌용%협신복
无患子%ISSR%正交优化%PCR反应体系
無患子%ISSR%正交優化%PCR反應體繫
무환자%ISSR%정교우화%PCR반응체계
应用改良CTAB法提取了无患子基因组DNA,该方法具有操作过程简单、耗时少、能有效降低无患子基因组DNA提取过程中酚类化合物、多糖等杂质的污染.正交试验研究了dNTP浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶这3个因素对ISSR-PCR反应的影响,建立并优化了适合于无患子ISSR-PCR的反应体系.优化的反应总体系20μl含1 ×PCR Buffer,0.4 mmol· L-1 dNTP,0.8μmol· L-1引物,0.75 U Taq DNA聚合酶,20 ng DNA模板.使用此ISSR扩增反应体系,获得了部分不同种质无患子DNA的清晰条带,验证了该体系的稳定性.优化的反应体系为后续无患子遗传多样性的研究奠定了基础.
應用改良CTAB法提取瞭無患子基因組DNA,該方法具有操作過程簡單、耗時少、能有效降低無患子基因組DNA提取過程中酚類化閤物、多糖等雜質的汙染.正交試驗研究瞭dNTP濃度、引物濃度、Taq DNA聚閤酶這3箇因素對ISSR-PCR反應的影響,建立併優化瞭適閤于無患子ISSR-PCR的反應體繫.優化的反應總體繫20μl含1 ×PCR Buffer,0.4 mmol· L-1 dNTP,0.8μmol· L-1引物,0.75 U Taq DNA聚閤酶,20 ng DNA模闆.使用此ISSR擴增反應體繫,穫得瞭部分不同種質無患子DNA的清晰條帶,驗證瞭該體繫的穩定性.優化的反應體繫為後續無患子遺傳多樣性的研究奠定瞭基礎.
응용개량CTAB법제취료무환자기인조DNA,해방법구유조작과정간단、모시소、능유효강저무환자기인조DNA제취과정중분류화합물、다당등잡질적오염.정교시험연구료dNTP농도、인물농도、Taq DNA취합매저3개인소대ISSR-PCR반응적영향,건립병우화료괄합우무환자ISSR-PCR적반응체계.우화적반응총체계20μl함1 ×PCR Buffer,0.4 mmol· L-1 dNTP,0.8μmol· L-1인물,0.75 U Taq DNA취합매,20 ng DNA모판.사용차ISSR확증반응체계,획득료부분불동충질무환자DNA적청석조대,험증료해체계적은정성.우화적반응체계위후속무환자유전다양성적연구전정료기출.
