中华乳腺病杂志（电子版）
中華乳腺病雜誌（電子版）
중화유선병잡지（전자판）
CHINESE JOURNAL OF BREAST DISEASE(ELECTRONIC VERSION)
2013年
1期
12-17
,共6页
王梦川%吴爱国%王日玮%原红军%李学孝%胡斌%邵国利%纪术峰%吴凯
王夢川%吳愛國%王日瑋%原紅軍%李學孝%鬍斌%邵國利%紀術峰%吳凱
왕몽천%오애국%왕일위%원홍군%리학효%호빈%소국리%기술봉%오개
乳腺肿瘤%beclin 1 基因%自噬
乳腺腫瘤%beclin 1 基因%自噬
유선종류%beclin 1 기인%자서
breast neoplasms%beclin 1%autophagy
目的 探讨转染beclin 1基因诱导三阴性乳腺癌BT-549细胞发生自噬及其对细胞生长的影响.方法 将BT-549细胞分为4组,包括空白组、空载体组、脂质体组和目的基因组,并以MDA-MB-231细胞作为阳性对照组.采用LipofectamineTM 2000携带含有beclin 1基因的质粒转染BT-549细胞,分别于转染后24、36、48、60 h用荧光显微镜观察转染效率;于转染后48 h利用RT-PCR检测各组细胞beclin 1 mRNA表达情况;转染后各组细胞分别在含10％胎牛血清1640培养基和无胎牛血清1640培养基内培养,并分别于24、48、72、96 h和12、24、36、48 h采用MTT法检测细胞的增殖率和存活率;各组细胞在无胎牛血清1640培养基内培养24 h后,采用流式细胞仪检测其细胞凋亡和细胞周期情况;各组细胞在无胎牛血清1640培养基内生长36 h后,经吖啶橙染色观察并比较发生自噬的细胞数.MTT数据按重复测量的方差分析进行统计,其余计量资料按单因素方差分析进行统计,计数资料按照R×C表资料的x2检验进行统计分析.结果 48 h时携带目的基因的质粒经脂质体转染BT-549细胞的效率最高;目的基因组细胞beclin 1 mRNR水平显著高于空白组、脂质体组、空载体组和阳性对照组(P＜0.01);在含10％胎牛血清1640培养基内,目的基因组细胞的增殖率显著低于空白组(F=112.1,P=0.00),而在无胎牛血清1640培养基内,目的基因组细胞36 h和48 h的存活率显著高于空白组(F=37.5,P=0.00);目的基因组细胞的凋亡比例增加(F=3914.4,P=0.00),且细胞处于Go/Gi期的比例升高(F=258.8,P=0.00);目的基因组细胞发生自噬的数量显著增加(x2=7.7,P=0.00).结论 向三阴性乳腺癌BT-549细胞转染beclin 1基因,可提高细胞的自噬水平.该作用可抑制细胞在正常培养环境下的增殖,但对低营养环境下的细胞存活具有保护作用.
目的 探討轉染beclin 1基因誘導三陰性乳腺癌BT-549細胞髮生自噬及其對細胞生長的影響.方法 將BT-549細胞分為4組,包括空白組、空載體組、脂質體組和目的基因組,併以MDA-MB-231細胞作為暘性對照組.採用LipofectamineTM 2000攜帶含有beclin 1基因的質粒轉染BT-549細胞,分彆于轉染後24、36、48、60 h用熒光顯微鏡觀察轉染效率;于轉染後48 h利用RT-PCR檢測各組細胞beclin 1 mRNA錶達情況;轉染後各組細胞分彆在含10％胎牛血清1640培養基和無胎牛血清1640培養基內培養,併分彆于24、48、72、96 h和12、24、36、48 h採用MTT法檢測細胞的增殖率和存活率;各組細胞在無胎牛血清1640培養基內培養24 h後,採用流式細胞儀檢測其細胞凋亡和細胞週期情況;各組細胞在無胎牛血清1640培養基內生長36 h後,經吖啶橙染色觀察併比較髮生自噬的細胞數.MTT數據按重複測量的方差分析進行統計,其餘計量資料按單因素方差分析進行統計,計數資料按照R×C錶資料的x2檢驗進行統計分析.結果 48 h時攜帶目的基因的質粒經脂質體轉染BT-549細胞的效率最高;目的基因組細胞beclin 1 mRNR水平顯著高于空白組、脂質體組、空載體組和暘性對照組(P＜0.01);在含10％胎牛血清1640培養基內,目的基因組細胞的增殖率顯著低于空白組(F=112.1,P=0.00),而在無胎牛血清1640培養基內,目的基因組細胞36 h和48 h的存活率顯著高于空白組(F=37.5,P=0.00);目的基因組細胞的凋亡比例增加(F=3914.4,P=0.00),且細胞處于Go/Gi期的比例升高(F=258.8,P=0.00);目的基因組細胞髮生自噬的數量顯著增加(x2=7.7,P=0.00).結論 嚮三陰性乳腺癌BT-549細胞轉染beclin 1基因,可提高細胞的自噬水平.該作用可抑製細胞在正常培養環境下的增殖,但對低營養環境下的細胞存活具有保護作用.
목적 탐토전염beclin 1기인유도삼음성유선암BT-549세포발생자서급기대세포생장적영향.방법 장BT-549세포분위4조,포괄공백조、공재체조、지질체조화목적기인조,병이MDA-MB-231세포작위양성대조조.채용LipofectamineTM 2000휴대함유beclin 1기인적질립전염BT-549세포,분별우전염후24、36、48、60 h용형광현미경관찰전염효솔;우전염후48 h이용RT-PCR검측각조세포beclin 1 mRNA표체정황;전염후각조세포분별재함10％태우혈청1640배양기화무태우혈청1640배양기내배양,병분별우24、48、72、96 h화12、24、36、48 h채용MTT법검측세포적증식솔화존활솔;각조세포재무태우혈청1640배양기내배양24 h후,채용류식세포의검측기세포조망화세포주기정황;각조세포재무태우혈청1640배양기내생장36 h후,경아정등염색관찰병비교발생자서적세포수.MTT수거안중복측량적방차분석진행통계,기여계량자료안단인소방차분석진행통계,계수자료안조R×C표자료적x2검험진행통계분석.결과 48 h시휴대목적기인적질립경지질체전염BT-549세포적효솔최고;목적기인조세포beclin 1 mRNR수평현저고우공백조、지질체조、공재체조화양성대조조(P＜0.01);재함10％태우혈청1640배양기내,목적기인조세포적증식솔현저저우공백조(F=112.1,P=0.00),이재무태우혈청1640배양기내,목적기인조세포36 h화48 h적존활솔현저고우공백조(F=37.5,P=0.00);목적기인조세포적조망비례증가(F=3914.4,P=0.00),차세포처우Go/Gi기적비례승고(F=258.8,P=0.00);목적기인조세포발생자서적수량현저증가(x2=7.7,P=0.00).결론 향삼음성유선암BT-549세포전염beclin 1기인,가제고세포적자서수평.해작용가억제세포재정상배양배경하적증식,단대저영양배경하적세포존활구유보호작용.
