实验动物科学
實驗動物科學
실험동물과학
LABORATORY ANIMAL SCIENCE
2013年
1期
1-5
,共5页
刘先菊%佟巍%向志光%张丽芳%李雨函%王艳蓉%魏强
劉先菊%佟巍%嚮誌光%張麗芳%李雨函%王豔蓉%魏彊
류선국%동외%향지광%장려방%리우함%왕염용%위강
仙台病毒抗原%酶联免疫吸附试验%免疫印迹试验%间接免疫荧光试验
仙檯病毒抗原%酶聯免疫吸附試驗%免疫印跡試驗%間接免疫熒光試驗
선태병독항원%매련면역흡부시험%면역인적시험%간접면역형광시험
目的 纯化和制备仙台病毒(Sendai Virus,SeV)抗原,初步应用于间接酶联免疫吸附试验(ELISA)及免疫印迹(Western-blot)试验对SeV抗体进行检测.方法 通过鸡胚尿囊腔及BHK-21细胞增殖法培养增殖SeV,低温冻融去除细胞碎片后,用差速离心及超声破碎法纯化并制备SeV抗原,以SDS-PAGE电泳进行纯度鉴定；优化确定间接SeV-ELISA抗原的最佳包被浓度,对比检测间接免疫荧光试验(IFA)初筛小鼠SeV阳性血清,同时用Western-blot检测法进行特异性验证.结果 用BHK-21细胞培养增殖的SeV,病毒滴度HA为1∶128,SeV抗原的电泳纯度达80％；确定SeV-ELISA抗原最佳包被浓度为2.5 μg/mL时,测得小鼠SeV抗体ELISA与IFA的阳性符合率为100％,并由Western-blot检测法得到了证实.结论 通过BHK-21细胞增殖和差速离心及超声破碎法制备的SeV抗原,可用于ELISA及Western-blot法对小鼠SeV抗体的检测,进而验证了SeV具有较强的抗原特异性及蛋白活性.
目的 純化和製備仙檯病毒(Sendai Virus,SeV)抗原,初步應用于間接酶聯免疫吸附試驗(ELISA)及免疫印跡(Western-blot)試驗對SeV抗體進行檢測.方法 通過鷄胚尿囊腔及BHK-21細胞增殖法培養增殖SeV,低溫凍融去除細胞碎片後,用差速離心及超聲破碎法純化併製備SeV抗原,以SDS-PAGE電泳進行純度鑒定；優化確定間接SeV-ELISA抗原的最佳包被濃度,對比檢測間接免疫熒光試驗(IFA)初篩小鼠SeV暘性血清,同時用Western-blot檢測法進行特異性驗證.結果 用BHK-21細胞培養增殖的SeV,病毒滴度HA為1∶128,SeV抗原的電泳純度達80％；確定SeV-ELISA抗原最佳包被濃度為2.5 μg/mL時,測得小鼠SeV抗體ELISA與IFA的暘性符閤率為100％,併由Western-blot檢測法得到瞭證實.結論 通過BHK-21細胞增殖和差速離心及超聲破碎法製備的SeV抗原,可用于ELISA及Western-blot法對小鼠SeV抗體的檢測,進而驗證瞭SeV具有較彊的抗原特異性及蛋白活性.
목적 순화화제비선태병독(Sendai Virus,SeV)항원,초보응용우간접매련면역흡부시험(ELISA)급면역인적(Western-blot)시험대SeV항체진행검측.방법 통과계배뇨낭강급BHK-21세포증식법배양증식SeV,저온동융거제세포쇄편후,용차속리심급초성파쇄법순화병제비SeV항원,이SDS-PAGE전영진행순도감정；우화학정간접SeV-ELISA항원적최가포피농도,대비검측간접면역형광시험(IFA)초사소서SeV양성혈청,동시용Western-blot검측법진행특이성험증.결과 용BHK-21세포배양증식적SeV,병독적도HA위1∶128,SeV항원적전영순도체80％；학정SeV-ELISA항원최가포피농도위2.5 μg/mL시,측득소서SeV항체ELISA여IFA적양성부합솔위100％,병유Western-blot검측법득도료증실.결론 통과BHK-21세포증식화차속리심급초성파쇄법제비적SeV항원,가용우ELISA급Western-blot법대소서SeV항체적검측,진이험증료SeV구유교강적항원특이성급단백활성.
