浙江大学学报（医学版）
浙江大學學報（醫學版）
절강대학학보（의학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY MEDICAL SCIENCES
2013年
2期
156-163
,共8页
郑林立%葛玉梅%胡玮琳%严杰
鄭林立%葛玉梅%鬍瑋琳%嚴傑
정림립%갈옥매%호위림%엄걸
问号钩端螺旋体%细菌外膜蛋白质类%基因表达%逆转录聚合酶链反应%感染%外膜蛋白%表达%OmpR%氯氰碘柳胺
問號鉤耑螺鏇體%細菌外膜蛋白質類%基因錶達%逆轉錄聚閤酶鏈反應%感染%外膜蛋白%錶達%OmpR%氯氰碘柳胺
문호구단라선체%세균외막단백질류%기인표체%역전록취합매련반응%감염%외막단백%표체%OmpR%록청전류알
目的:了解感染人巨噬细胞过程中问号钩端螺旋体(简称钩体)黄疸出血群赖型赖株主要外膜蛋白(OMP)抗原表达水平变化及其OmpR相关基因调控机制.方法:采用生物信息学技术预测问号钩体赖株OmpR及其组氨酸激酶(HK)基因和结构功能域.采用实时荧光定量RT-PCR检测钧体感染人THP-1巨噬细胞前后钩体主要OMP编码基因mRNA水平的变化.采用HK胞外区多肽抗血清封闭试验及氯氰碘柳胺阻断试验,检测OmpR及其HK对感染过程中问号钩体OMP编码基因mRNA水平变化的影响.结果:生物信息学分析结果显示,LB015和LB333可能是问号钧体赖株OmpR编码基因,LB014可能是其HK编码基因.问号钩体赖株感染THP-1细胞后,lipL21、lipL32、lipL41基因mRNA水平迅速并持续下降(P＜0.01),groEL、mce、loa22、ligB基因mRNA水平瞬时迅速升高(P＜0.01).氯氰碘柳胺或HK抗血清处理可使感染THP-1细胞而显著下降的问号钩体lipL21和lipL48基因mRNA水平明显回升(P＜0.01),氯氰碘柳胺处理可使感染THP-1细胞而显著升高的groEL、mce、loa22、ligB基因mRNA水平明显下降(P＜0.01).结论:问号钩体赖株感染人巨噬细胞后主要OMP抗原表达水平发生明显变化.问号钩体赖株染色体中存在一组编码OmpR及其HK的基因,其主要功能可能是下调感染过程中部分OMP抗原表达水平.
目的:瞭解感染人巨噬細胞過程中問號鉤耑螺鏇體(簡稱鉤體)黃疸齣血群賴型賴株主要外膜蛋白(OMP)抗原錶達水平變化及其OmpR相關基因調控機製.方法:採用生物信息學技術預測問號鉤體賴株OmpR及其組氨痠激酶(HK)基因和結構功能域.採用實時熒光定量RT-PCR檢測鈞體感染人THP-1巨噬細胞前後鉤體主要OMP編碼基因mRNA水平的變化.採用HK胞外區多肽抗血清封閉試驗及氯氰碘柳胺阻斷試驗,檢測OmpR及其HK對感染過程中問號鉤體OMP編碼基因mRNA水平變化的影響.結果:生物信息學分析結果顯示,LB015和LB333可能是問號鈞體賴株OmpR編碼基因,LB014可能是其HK編碼基因.問號鉤體賴株感染THP-1細胞後,lipL21、lipL32、lipL41基因mRNA水平迅速併持續下降(P＜0.01),groEL、mce、loa22、ligB基因mRNA水平瞬時迅速升高(P＜0.01).氯氰碘柳胺或HK抗血清處理可使感染THP-1細胞而顯著下降的問號鉤體lipL21和lipL48基因mRNA水平明顯迴升(P＜0.01),氯氰碘柳胺處理可使感染THP-1細胞而顯著升高的groEL、mce、loa22、ligB基因mRNA水平明顯下降(P＜0.01).結論:問號鉤體賴株感染人巨噬細胞後主要OMP抗原錶達水平髮生明顯變化.問號鉤體賴株染色體中存在一組編碼OmpR及其HK的基因,其主要功能可能是下調感染過程中部分OMP抗原錶達水平.
목적:료해감염인거서세포과정중문호구단라선체(간칭구체)황달출혈군뢰형뢰주주요외막단백(OMP)항원표체수평변화급기OmpR상관기인조공궤제.방법:채용생물신식학기술예측문호구체뢰주OmpR급기조안산격매(HK)기인화결구공능역.채용실시형광정량RT-PCR검측균체감염인THP-1거서세포전후구체주요OMP편마기인mRNA수평적변화.채용HK포외구다태항혈청봉폐시험급록청전류알조단시험,검측OmpR급기HK대감염과정중문호구체OMP편마기인mRNA수평변화적영향.결과:생물신식학분석결과현시,LB015화LB333가능시문호균체뢰주OmpR편마기인,LB014가능시기HK편마기인.문호구체뢰주감염THP-1세포후,lipL21、lipL32、lipL41기인mRNA수평신속병지속하강(P＜0.01),groEL、mce、loa22、ligB기인mRNA수평순시신속승고(P＜0.01).록청전류알혹HK항혈청처리가사감염THP-1세포이현저하강적문호구체lipL21화lipL48기인mRNA수평명현회승(P＜0.01),록청전류알처리가사감염THP-1세포이현저승고적groEL、mce、loa22、ligB기인mRNA수평명현하강(P＜0.01).결론:문호구체뢰주감염인거서세포후주요OMP항원표체수평발생명현변화.문호구체뢰주염색체중존재일조편마OmpR급기HK적기인,기주요공능가능시하조감염과정중부분OMP항원표체수평.
