江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
2期
405-409
,共5页
刘芳%都立辉%王道营%徐为民%霍贵成
劉芳%都立輝%王道營%徐為民%霍貴成
류방%도립휘%왕도영%서위민%곽귀성
表达载体%嗜热链球菌%codY基因%启动子
錶達載體%嗜熱鏈毬菌%codY基因%啟動子
표체재체%기열련구균%codY기인%계동자
为研究转录调控蛋白codY基因启动子的功能,首先从嗜热链球菌KLDS3.0503中克隆出codY基因启动子,将该启动子连入启动子探针型载体pNZ273的gusA基因上游,获得重组质粒pNZ273/codY.通过分析嗜热链球菌KLDS3.8501携带的质粒p3.8501-1的全序列后,将p3.8501-1质粒的复制区段与pNZ273/codY质粒中氯霉素抗性基因、codY基因启动子和gusA基因的片断连接到一起,电转化入嗜热链球菌KLDS3.0503中,获得重组质粒pST1.在乳酸乳球菌和嗜热链球菌中,该启动子均能启动下游gusA基因的表达,并且当菌株生长到对数生长期时,才检测到β-葡糖苷酸酶的活性.这说明codY启动子凭借自身的调控机制可以起到诱导型启动子的作用,并能控制外源基因的表达.
為研究轉錄調控蛋白codY基因啟動子的功能,首先從嗜熱鏈毬菌KLDS3.0503中剋隆齣codY基因啟動子,將該啟動子連入啟動子探針型載體pNZ273的gusA基因上遊,穫得重組質粒pNZ273/codY.通過分析嗜熱鏈毬菌KLDS3.8501攜帶的質粒p3.8501-1的全序列後,將p3.8501-1質粒的複製區段與pNZ273/codY質粒中氯黴素抗性基因、codY基因啟動子和gusA基因的片斷連接到一起,電轉化入嗜熱鏈毬菌KLDS3.0503中,穫得重組質粒pST1.在乳痠乳毬菌和嗜熱鏈毬菌中,該啟動子均能啟動下遊gusA基因的錶達,併且噹菌株生長到對數生長期時,纔檢測到β-葡糖苷痠酶的活性.這說明codY啟動子憑藉自身的調控機製可以起到誘導型啟動子的作用,併能控製外源基因的錶達.
위연구전록조공단백codY기인계동자적공능,수선종기열련구균KLDS3.0503중극륭출codY기인계동자,장해계동자련입계동자탐침형재체pNZ273적gusA기인상유,획득중조질립pNZ273/codY.통과분석기열련구균KLDS3.8501휴대적질립p3.8501-1적전서렬후,장p3.8501-1질립적복제구단여pNZ273/codY질립중록매소항성기인、codY기인계동자화gusA기인적편단련접도일기,전전화입기열련구균KLDS3.0503중,획득중조질립pST1.재유산유구균화기열련구균중,해계동자균능계동하유gusA기인적표체,병차당균주생장도대수생장기시,재검측도β-포당감산매적활성.저설명codY계동자빙차자신적조공궤제가이기도유도형계동자적작용,병능공제외원기인적표체.
