工业微生物
工業微生物
공업미생물
INDUSTRIAL MICROBIOLOGY
2013年
2期
22-27
,共6页
米根霉脂肪酶%毕赤酵母%高效表达
米根黴脂肪酶%畢赤酵母%高效錶達
미근매지방매%필적효모%고효표체
米根霉(Rhizopus oryzae)脂肪酶在食品和油脂加工等方面具有广泛的应用前景.本研究通过PCR技术获得了米根霉脂肪酶前肽基因序列与成熟肽基因序列(ProROL),并将该基因克隆到表达载体pPIC9K上.线性化表达质粒后电转化感受态毕赤酵母菌株(Pichia pastoris)GS115,通过筛选得到了阳性重组菌.摇瓶及7L罐发酵结果显示,以p-NPP为底物,上清胞外酶活分别为10.6 U/mL和126.8 U/mL.酶学性质研究发现,该酶的最适温度为40℃左右,在低于40℃条件下,保温30 min后,能够保存60％以上的酶活力；其最适pH为8.5左右,在pH 6.0-10.0范围内保持1h后,均能保留60％以上的酶活力.本研究构建的基因重组菌株将为该酶的工业化生产与应用提供一定的理论基础.
米根黴(Rhizopus oryzae)脂肪酶在食品和油脂加工等方麵具有廣汎的應用前景.本研究通過PCR技術穫得瞭米根黴脂肪酶前肽基因序列與成熟肽基因序列(ProROL),併將該基因剋隆到錶達載體pPIC9K上.線性化錶達質粒後電轉化感受態畢赤酵母菌株(Pichia pastoris)GS115,通過篩選得到瞭暘性重組菌.搖瓶及7L罐髮酵結果顯示,以p-NPP為底物,上清胞外酶活分彆為10.6 U/mL和126.8 U/mL.酶學性質研究髮現,該酶的最適溫度為40℃左右,在低于40℃條件下,保溫30 min後,能夠保存60％以上的酶活力；其最適pH為8.5左右,在pH 6.0-10.0範圍內保持1h後,均能保留60％以上的酶活力.本研究構建的基因重組菌株將為該酶的工業化生產與應用提供一定的理論基礎.
미근매(Rhizopus oryzae)지방매재식품화유지가공등방면구유엄범적응용전경.본연구통과PCR기술획득료미근매지방매전태기인서렬여성숙태기인서렬(ProROL),병장해기인극륭도표체재체pPIC9K상.선성화표체질립후전전화감수태필적효모균주(Pichia pastoris)GS115,통과사선득도료양성중조균.요병급7L관발효결과현시,이p-NPP위저물,상청포외매활분별위10.6 U/mL화126.8 U/mL.매학성질연구발현,해매적최괄온도위40℃좌우,재저우40℃조건하,보온30 min후,능구보존60％이상적매활력；기최괄pH위8.5좌우,재pH 6.0-10.0범위내보지1h후,균능보류60％이상적매활력.본연구구건적기인중조균주장위해매적공업화생산여응용제공일정적이론기출.
