草业学报
草業學報
초업학보
PRATACULTURAL SCIENCE
2013年
2期
150-157
,共8页
刘莹%才华%刘晶%柏锡%纪巍%朱延明
劉瑩%纔華%劉晶%柏錫%紀巍%硃延明
류형%재화%류정%백석%기외%주연명
GsCRCK基因%农菁1号苜蓿%遗传转化%耐盐性
GsCRCK基因%農菁1號苜蓿%遺傳轉化%耐鹽性
GsCRCK기인%농정1호목숙%유전전화%내염성
GsCRCK基因是参与胁迫早期应答的钙/钙调素调控的受体类蛋白激酶基因,研究发现GsCRCK正向调控拟南芥对NaCl和ABA胁迫的耐性,将耐盐蛋白激酶基因GsCRCK转化苜蓿,对于增强苜蓿的耐盐性具有重要的现实意义.本研究采用农杆菌介导法将其转入农菁1号苜蓿,获得大量抗性植株.经PCR和RT-PCR检测证明GsCRCK基因已整合到农菁1号苜蓿基因组中并在转基因植株中转录表达.对获得的2个转基因株系进行耐盐性分析,在300 mmol/L NaCl条件下进行胁迫处理,测定处理0,3,6,9,12,15d后的质膜透性、丙二醛(MDA)和叶绿素(Chl)含量,以及胁迫15d时的SOD活性;并统计400 mmol/L NaCl处理15 d时各株系的死亡率.结果显示,300 mmol/L高盐胁迫15d后转基因苜蓿仍能正常生长,而野生型苜蓿则遭受盐害严重;转基因苜蓿的相对电导率极显著低于野生型,MDA含量也显著低于野生型,而Chl含量和SOD活性都显著高于野生型;在400mmol/L NaCl处理下,2个转基因株系的死亡率分别为13.33%和10.00%,明显低于野生型植株(63.33%).表明GsCRCK基因的导入提高了转基因苜蓿的耐盐性.
GsCRCK基因是參與脅迫早期應答的鈣/鈣調素調控的受體類蛋白激酶基因,研究髮現GsCRCK正嚮調控擬南芥對NaCl和ABA脅迫的耐性,將耐鹽蛋白激酶基因GsCRCK轉化苜蓿,對于增彊苜蓿的耐鹽性具有重要的現實意義.本研究採用農桿菌介導法將其轉入農菁1號苜蓿,穫得大量抗性植株.經PCR和RT-PCR檢測證明GsCRCK基因已整閤到農菁1號苜蓿基因組中併在轉基因植株中轉錄錶達.對穫得的2箇轉基因株繫進行耐鹽性分析,在300 mmol/L NaCl條件下進行脅迫處理,測定處理0,3,6,9,12,15d後的質膜透性、丙二醛(MDA)和葉綠素(Chl)含量,以及脅迫15d時的SOD活性;併統計400 mmol/L NaCl處理15 d時各株繫的死亡率.結果顯示,300 mmol/L高鹽脅迫15d後轉基因苜蓿仍能正常生長,而野生型苜蓿則遭受鹽害嚴重;轉基因苜蓿的相對電導率極顯著低于野生型,MDA含量也顯著低于野生型,而Chl含量和SOD活性都顯著高于野生型;在400mmol/L NaCl處理下,2箇轉基因株繫的死亡率分彆為13.33%和10.00%,明顯低于野生型植株(63.33%).錶明GsCRCK基因的導入提高瞭轉基因苜蓿的耐鹽性.
GsCRCK기인시삼여협박조기응답적개/개조소조공적수체류단백격매기인,연구발현GsCRCK정향조공의남개대NaCl화ABA협박적내성,장내염단백격매기인GsCRCK전화목숙,대우증강목숙적내염성구유중요적현실의의.본연구채용농간균개도법장기전입농정1호목숙,획득대량항성식주.경PCR화RT-PCR검측증명GsCRCK기인이정합도농정1호목숙기인조중병재전기인식주중전록표체.대획득적2개전기인주계진행내염성분석,재300 mmol/L NaCl조건하진행협박처리,측정처리0,3,6,9,12,15d후적질막투성、병이철(MDA)화협록소(Chl)함량,이급협박15d시적SOD활성;병통계400 mmol/L NaCl처리15 d시각주계적사망솔.결과현시,300 mmol/L고염협박15d후전기인목숙잉능정상생장,이야생형목숙칙조수염해엄중;전기인목숙적상대전도솔겁현저저우야생형,MDA함량야현저저우야생형,이Chl함량화SOD활성도현저고우야생형;재400mmol/L NaCl처리하,2개전기인주계적사망솔분별위13.33%화10.00%,명현저우야생형식주(63.33%).표명GsCRCK기인적도입제고료전기인목숙적내염성.