实用临床医药杂志
實用臨床醫藥雜誌
실용림상의약잡지
JOURNAL OF JIANGSU CLINICAL MEDICINE
2013年
3期
1-4,27
,共5页
郝波%蒋建霞%施瑞华%张国新%成道祥
郝波%蔣建霞%施瑞華%張國新%成道祥
학파%장건하%시서화%장국신%성도상
Hiwi基因%miRNA干扰%真核表达质粒%肝癌
Hiwi基因%miRNA榦擾%真覈錶達質粒%肝癌
Hiwi기인%miRNA간우%진핵표체질립%간암
目的 构建人Hiwi基因miRNA干扰质粒,探讨其对肝癌7721细胞株中Hiwi基因和蛋白表达的阻抑作用.方法 根据Homo sapiens Hiwi基因序列,设计RNA干扰靶点,构建4对Hiwi的pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR miRNA及1对无效对照miRNA干扰质粒并将其转染至肝癌7721细胞中,通过RT-PCR和Western blot检测7721细胞中Hiwi mRNA和蛋白的表达水平.结果 成功构建了4对Hiwi miRNA干扰质粒及无效干扰质粒,测序表明Hiwi干扰序列及读框完全正确.RT-PCR和Western blot结果显示,与未转染组及阴性对照组比较,转染该载体能有效下调7721细胞株中mRNA和蛋白的表达.结论 成功构建了Hiwi的干扰表达载体,为进一步探讨Hiwi基因在肝癌中的相关机制提供了实验基础.
目的 構建人Hiwi基因miRNA榦擾質粒,探討其對肝癌7721細胞株中Hiwi基因和蛋白錶達的阻抑作用.方法 根據Homo sapiens Hiwi基因序列,設計RNA榦擾靶點,構建4對Hiwi的pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR miRNA及1對無效對照miRNA榦擾質粒併將其轉染至肝癌7721細胞中,通過RT-PCR和Western blot檢測7721細胞中Hiwi mRNA和蛋白的錶達水平.結果 成功構建瞭4對Hiwi miRNA榦擾質粒及無效榦擾質粒,測序錶明Hiwi榦擾序列及讀框完全正確.RT-PCR和Western blot結果顯示,與未轉染組及陰性對照組比較,轉染該載體能有效下調7721細胞株中mRNA和蛋白的錶達.結論 成功構建瞭Hiwi的榦擾錶達載體,為進一步探討Hiwi基因在肝癌中的相關機製提供瞭實驗基礎.
목적 구건인Hiwi기인miRNA간우질립,탐토기대간암7721세포주중Hiwi기인화단백표체적조억작용.방법 근거Homo sapiens Hiwi기인서렬,설계RNA간우파점,구건4대Hiwi적pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR miRNA급1대무효대조miRNA간우질립병장기전염지간암7721세포중,통과RT-PCR화Western blot검측7721세포중Hiwi mRNA화단백적표체수평.결과 성공구건료4대Hiwi miRNA간우질립급무효간우질립,측서표명Hiwi간우서렬급독광완전정학.RT-PCR화Western blot결과현시,여미전염조급음성대조조비교,전염해재체능유효하조7721세포주중mRNA화단백적표체.결론 성공구건료Hiwi적간우표체재체,위진일보탐토Hiwi기인재간암중적상관궤제제공료실험기출.
