青岛农业大学学报（自然科学版）
青島農業大學學報（自然科學版）
청도농업대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF QINGDAO AGRICULTURAL UNIVERSITY
2013年
2期
91-95
,共5页
张文平%周婧%李方正%宋学雄
張文平%週婧%李方正%宋學雄
장문평%주청%리방정%송학웅
仔猪成纤维细胞%抗猪瘟病毒质粒%电穿孔%转染
仔豬成纖維細胞%抗豬瘟病毒質粒%電穿孔%轉染
자저성섬유세포%항저온병독질립%전천공%전염
piglet fibroblasts%anti-swine fever virus plasmid DNA%electtroporation%transfection
本研究旨在用电穿孔法介导抗猪瘟病毒基因质粒转染仔猪成纤维细胞,优化电穿孔法转染条件.采用本实验培养的P6代仔猪成纤维细胞,用电穿孔法介导转染抗猪瘟病毒质粒,在电压、脉冲时间、脉冲次数、质粒DNA用量、电击后温度、电击缓冲液、质粒DNA构型等方面进行了转染条件优化的探索.结果显示,当电压为220V、脉冲时间25ms、脉冲1次,环形DNA用量为12μg,电击缓冲液为限定电转液时,细胞转染率高达47.49％.这些结果表明,用电穿孔法介导抗猪瘟病毒基因质粒转染仔猪成纤维细胞,可获得比较理想的细胞转染率.
本研究旨在用電穿孔法介導抗豬瘟病毒基因質粒轉染仔豬成纖維細胞,優化電穿孔法轉染條件.採用本實驗培養的P6代仔豬成纖維細胞,用電穿孔法介導轉染抗豬瘟病毒質粒,在電壓、脈遲時間、脈遲次數、質粒DNA用量、電擊後溫度、電擊緩遲液、質粒DNA構型等方麵進行瞭轉染條件優化的探索.結果顯示,噹電壓為220V、脈遲時間25ms、脈遲1次,環形DNA用量為12μg,電擊緩遲液為限定電轉液時,細胞轉染率高達47.49％.這些結果錶明,用電穿孔法介導抗豬瘟病毒基因質粒轉染仔豬成纖維細胞,可穫得比較理想的細胞轉染率.
본연구지재용전천공법개도항저온병독기인질립전염자저성섬유세포,우화전천공법전염조건.채용본실험배양적P6대자저성섬유세포,용전천공법개도전염항저온병독질립,재전압、맥충시간、맥충차수、질립DNA용량、전격후온도、전격완충액、질립DNA구형등방면진행료전염조건우화적탐색.결과현시,당전압위220V、맥충시간25ms、맥충1차,배형DNA용량위12μg,전격완충액위한정전전액시,세포전염솔고체47.49％.저사결과표명,용전천공법개도항저온병독기인질립전염자저성섬유세포,가획득비교이상적세포전염솔.
