上海交通大学学报（农业科学版）
上海交通大學學報（農業科學版）
상해교통대학학보（농업과학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(AGRICULTURAL SCIENCE)
2013年
4期
83-87
,共5页
郭亮%傅艳琨%吴更%崔立%华修国
郭亮%傅豔琨%吳更%崔立%華脩國
곽량%부염곤%오경%최립%화수국
戊型肝炎病毒%ORF3%免疫共沉淀%质谱%RPS18
戊型肝炎病毒%ORF3%免疫共沉澱%質譜%RPS18
무형간염병독%ORF3%면역공침정%질보%RPS18
hepatitis E virus%ORF3%Co-immunoprecipitation%mass spectrometry%RPS18
戊型肝炎病毒编码3个开放性阅读框:ORF1,ORF2和ORF3,其中ORF3蛋白的功能目前尚不明确.为了进一步了解其功能,研究构建了ORF3哺乳动物表达载体pcDNA3.1Flag-ORF3,利用免疫共沉淀和LC/MS的方法筛选并鉴定肝细胞中可以和ORF3蛋白相互作用的蛋白.结果显示,成功构建了Ⅳ型戊型肝炎ORF3的重组表达载体,并利用免疫印迹检测其可以在哺乳动物细胞中正常表达ORF3蛋白,在肝癌细胞株HepG2中筛选并鉴定到了7个可能和ORF3相互用的蛋白,并推测其中RPS18的可能性较大,进而推测HEV可能通过ORF3与核糖体直接相互作用,从而影响其所感染的细胞中蛋白的正常翻译过程.本研究为进一步认识戊型肝炎病毒ORF3的功能提供了线索,进而有利于揭示戊型肝炎病毒的致病机理.
戊型肝炎病毒編碼3箇開放性閱讀框:ORF1,ORF2和ORF3,其中ORF3蛋白的功能目前尚不明確.為瞭進一步瞭解其功能,研究構建瞭ORF3哺乳動物錶達載體pcDNA3.1Flag-ORF3,利用免疫共沉澱和LC/MS的方法篩選併鑒定肝細胞中可以和ORF3蛋白相互作用的蛋白.結果顯示,成功構建瞭Ⅳ型戊型肝炎ORF3的重組錶達載體,併利用免疫印跡檢測其可以在哺乳動物細胞中正常錶達ORF3蛋白,在肝癌細胞株HepG2中篩選併鑒定到瞭7箇可能和ORF3相互用的蛋白,併推測其中RPS18的可能性較大,進而推測HEV可能通過ORF3與覈糖體直接相互作用,從而影響其所感染的細胞中蛋白的正常翻譯過程.本研究為進一步認識戊型肝炎病毒ORF3的功能提供瞭線索,進而有利于揭示戊型肝炎病毒的緻病機理.
무형간염병독편마3개개방성열독광:ORF1,ORF2화ORF3,기중ORF3단백적공능목전상불명학.위료진일보료해기공능,연구구건료ORF3포유동물표체재체pcDNA3.1Flag-ORF3,이용면역공침정화LC/MS적방법사선병감정간세포중가이화ORF3단백상호작용적단백.결과현시,성공구건료Ⅳ형무형간염ORF3적중조표체재체,병이용면역인적검측기가이재포유동물세포중정상표체ORF3단백,재간암세포주HepG2중사선병감정도료7개가능화ORF3상호용적단백,병추측기중RPS18적가능성교대,진이추측HEV가능통과ORF3여핵당체직접상호작용,종이영향기소감염적세포중단백적정상번역과정.본연구위진일보인식무형간염병독ORF3적공능제공료선색,진이유리우게시무형간염병독적치병궤리.
