中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2012年
5期
1090-1094
,共5页
慢性髓系白血病%P210bcr/abl融合基因%RNA干扰%慢病毒载体
慢性髓繫白血病%P210bcr/abl融閤基因%RNA榦擾%慢病毒載體
만성수계백혈병%P210bcr/abl융합기인%RNA간우%만병독재체
P210bcr/abl融合基因在慢性髓系白血病(CML)发生、发展中起重要作用.针对P210bcr/abl融合基因的小分子抑制剂(如伊马替尼)治疗CML非常有效,但容易产生耐药性.P210bcr/abl基因的融合区为RNA干扰其表达提供了一个特异性靶点.本研究通过病毒载体建立能同时表达P210bcr/abl shRNA和P210bcr/abl基因的BaF3细胞系,并探讨慢病毒介导的shRNA对P210bcr/abl基因表达的作用.用荧光显微镜检测慢病毒对BaF3细胞的感染率,用台盼蓝拒染法检测细胞的增殖能力；用RT-PCR和Western blot分别检测P210bcr/abl mRNA和蛋白的表达.结果发现,P210bcr/ablshRNA能使BaF3-P210bcr/abl细胞中的P210bcr/ablmRNA及蛋白表达明显下降,并且能增强BaF3-P210bcr/abl细胞对伊马替尼的敏感性,与不表达P210bcr/abl shRNA的BaF3-P210bcr/abl细胞相比,伊马替尼对该细胞系的IC50下降50％以上.将该细胞由尾静脉移植到受致死剂量照射的裸小鼠体内,移植该细胞的小鼠生存期较移植BaF3-P210 bcr/abl细胞的小鼠生存期明显延长.结论:稳定表达针对P210bcr/abl基因融合区的shRNA可能增强CML常规治疗的效果.
P210bcr/abl融閤基因在慢性髓繫白血病(CML)髮生、髮展中起重要作用.針對P210bcr/abl融閤基因的小分子抑製劑(如伊馬替尼)治療CML非常有效,但容易產生耐藥性.P210bcr/abl基因的融閤區為RNA榦擾其錶達提供瞭一箇特異性靶點.本研究通過病毒載體建立能同時錶達P210bcr/abl shRNA和P210bcr/abl基因的BaF3細胞繫,併探討慢病毒介導的shRNA對P210bcr/abl基因錶達的作用.用熒光顯微鏡檢測慢病毒對BaF3細胞的感染率,用檯盼藍拒染法檢測細胞的增殖能力；用RT-PCR和Western blot分彆檢測P210bcr/abl mRNA和蛋白的錶達.結果髮現,P210bcr/ablshRNA能使BaF3-P210bcr/abl細胞中的P210bcr/ablmRNA及蛋白錶達明顯下降,併且能增彊BaF3-P210bcr/abl細胞對伊馬替尼的敏感性,與不錶達P210bcr/abl shRNA的BaF3-P210bcr/abl細胞相比,伊馬替尼對該細胞繫的IC50下降50％以上.將該細胞由尾靜脈移植到受緻死劑量照射的裸小鼠體內,移植該細胞的小鼠生存期較移植BaF3-P210 bcr/abl細胞的小鼠生存期明顯延長.結論:穩定錶達針對P210bcr/abl基因融閤區的shRNA可能增彊CML常規治療的效果.
P210bcr/abl융합기인재만성수계백혈병(CML)발생、발전중기중요작용.침대P210bcr/abl융합기인적소분자억제제(여이마체니)치료CML비상유효,단용역산생내약성.P210bcr/abl기인적융합구위RNA간우기표체제공료일개특이성파점.본연구통과병독재체건립능동시표체P210bcr/abl shRNA화P210bcr/abl기인적BaF3세포계,병탐토만병독개도적shRNA대P210bcr/abl기인표체적작용.용형광현미경검측만병독대BaF3세포적감염솔,용태반람거염법검측세포적증식능력；용RT-PCR화Western blot분별검측P210bcr/abl mRNA화단백적표체.결과발현,P210bcr/ablshRNA능사BaF3-P210bcr/abl세포중적P210bcr/ablmRNA급단백표체명현하강,병차능증강BaF3-P210bcr/abl세포대이마체니적민감성,여불표체P210bcr/abl shRNA적BaF3-P210bcr/abl세포상비,이마체니대해세포계적IC50하강50％이상.장해세포유미정맥이식도수치사제량조사적라소서체내,이식해세포적소서생존기교이식BaF3-P210 bcr/abl세포적소서생존기명현연장.결론:은정표체침대P210bcr/abl기인융합구적shRNA가능증강CML상규치료적효과.
