CAJ | 학술논문

新的特异性细胞表面标记的发现是提高调节性T细胞(Treg)测量和分选技术的重要环节,Foxp3是公认的天然Treg的标记,却不能作为分选细胞的标记,CD127是新发现低表达于Treg细胞表面的标记.本实验测定CD4+CD25+CD127low/-和CD4+CD25+Foxp3+标记的小鼠外周血及脾脏Treg细胞的数量,并测定CD4+CD25+CD127low/-细胞内Foxp3转录因子的表达水平,分析CD4+CD25+CD127low/-标记在小鼠Treg细胞测定及分选的价值.收集BALB/c小鼠外周血及制备脾细胞悬液,分别三重荧光染色CD4、CD25、CD127及CD4、CD25、Foxp3后应用流式细胞仪检测,得出CD4+CD25+CD127low/-、CD4+CD25+Foxp3+这两种标记的小鼠外周血和脾脏Treg细胞的比例；再在CD4、CD25、Foxp3基础上加CD127染色(四重荧光染色),检测CD4+CD25+CD127low/-细胞Foxp3转录因子的表达情况.结果显示:①BALB/c小鼠外周血CD4+T细胞的分布:在总T细胞中CD4+TCD4+CD25+T细胞的中位表达水平分别为39.02％、5.35％；在CD4+T细胞中CD4+CD25+CD127low/-、CD4+CD25+Foxp3+细胞的中位表达水平分别为7.13％、3.97％；②BALB/c小鼠脾脏CD4+T细胞的分布:在总T细胞中CD4+T、CD4+CD25+T细胞的中位表达水平分别为23.49％、3.86％；在CD4+T细胞中CD4+ CD25+ CD127low/-、CD4+CD25+Foxp3+细胞的中位表达水平分别为12.8％、8.23％；③BALB/c小鼠外周血和脾脏CD4+CD25+CD127low/-细胞比例高于CD4+CD25+Foxp3+细胞,以脾脏更为明显(P＜0.01)；④小鼠外周血及脾脏CD4+CD25+CD127low-细胞高表达Foxp3转录因子,CD4+CD25+Foxp3+细胞低表达CD127.结论:BALB/c小鼠外周血和脾脏CD4+CD25+CD127low/-较CD4+CD25+Foxp3+能定量更多的Treg细胞；CD127low/-作为CD4+CD25+Treg细胞表面的特征性标志,在细胞分选时受其他细胞的干扰最小,是定量和纯化小鼠Treg细胞的更好标记选择.
신적특이성세포표면표기적발현시제고조절성T세포(Treg)측량화분선기술적중요배절,Foxp3시공인적천연Treg적표기,각불능작위분선세포적표기,CD127시신발현저표체우Treg세포표면적표기.본실험측정CD4+CD25+CD127low/-화CD4+CD25+Foxp3+표기적소서외주혈급비장Treg세포적수량,병측정CD4+CD25+CD127low/-세포내Foxp3전록인자적표체수평,분석CD4+CD25+CD127low/-표기재소서Treg세포측정급분선적개치.수집BALB/c소서외주혈급제비비세포현액,분별삼중형광염색CD4、CD25、CD127급CD4、CD25、Foxp3후응용류식세포의검측,득출CD4+CD25+CD127low/-、CD4+CD25+Foxp3+저량충표기적소서외주혈화비장Treg세포적비례；재재CD4、CD25、Foxp3기출상가CD127염색(사중형광염색),검측CD4+CD25+CD127low/-세포Foxp3전록인자적표체정황.결과현시:①BALB/c소서외주혈CD4+T세포적분포:재총T세포중CD4+TCD4+CD25+T세포적중위표체수평분별위39.02％、5.35％；재CD4+T세포중CD4+CD25+CD127low/-、CD4+CD25+Foxp3+세포적중위표체수평분별위7.13％、3.97％；②BALB/c소서비장CD4+T세포적분포:재총T세포중CD4+T、CD4+CD25+T세포적중위표체수평분별위23.49％、3.86％；재CD4+T세포중CD4+ CD25+ CD127low/-、CD4+CD25+Foxp3+세포적중위표체수평분별위12.8％、8.23％；③BALB/c소서외주혈화비장CD4+CD25+CD127low/-세포비례고우CD4+CD25+Foxp3+세포,이비장경위명현(P＜0.01)；④소서외주혈급비장CD4+CD25+CD127low-세포고표체Foxp3전록인자,CD4+CD25+Foxp3+세포저표체CD127.결론:BALB/c소서외주혈화비장CD4+CD25+CD127low/-교CD4+CD25+Foxp3+능정량경다적Treg세포；CD127low/-작위CD4+CD25+Treg세포표면적특정성표지,재세포분선시수기타세포적간우최소,시정량화순화소서Treg세포적경호표기선택.