CAJ | 학술논문

本研究通过检测经程控降温液氮保存前后的富集造血干/祖细胞的外周血单个核细胞(PBMNC)的活性氧(ROS)水平及造血干/祖细胞归巢分子的表达,分析二者之间的相关性.以冻存PBMNC为实验组,以新分离PBMNC为对照组,通过台盼蓝染色方法检测2组细胞的存活率；通过流式细胞分析法检测2组细胞ROS水平；通过流式细胞分析法检测造血干/祖细胞表面抗原CD34、CD133以及归巢相关分子VLA4、CXCR4、CD44的表达；通过相关系数分析ROS水平与归巢分子表达之间的相关性.结果表明:PBMNC随冻存时间延长存活率逐渐降低,冻存3、6、9、12个月的细胞存活率比冻前显著降低(P＜0.05)；造血干/祖细胞表面标志性抗原CD34、CD133及归巢相关分子CD44、VLA4、CXCR4表达率随冻存时间的延长有所下降,冷冻保存1年后的表达率比冻存前显著降低(P＜0.05)；随着冷冻保存时间的延长,细胞内ROS水平逐渐升高,冻存6、9、12个月后细胞内ROS水平比冻存前显著升高(P＜0.05).PBMNC内ROS水平与造血干/祖细胞CD34+ VLA4+、CD34+ CXCR4+、CD34+ CD44+双阳性表达率均呈负相关(相关系数分别为-0.503、-0.457、-0.465).结论:造血干/祖细胞的归巢黏附分子表达随冻存时间延长而逐渐下降；冻存的PBMNC中的ROS水平与造血干/祖细胞归巢黏附分子表达率成显著负相关；ROS水平增高可能是冻存外周血造血干/祖细胞归巢功能降低的原因之一.
본연구통과검측경정공강온액담보존전후적부집조혈간/조세포적외주혈단개핵세포(PBMNC)적활성양(ROS)수평급조혈간/조세포귀소분자적표체,분석이자지간적상관성.이동존PBMNC위실험조,이신분리PBMNC위대조조,통과태반람염색방법검측2조세포적존활솔；통과류식세포분석법검측2조세포ROS수평；통과류식세포분석법검측조혈간/조세포표면항원CD34、CD133이급귀소상관분자VLA4、CXCR4、CD44적표체；통과상관계수분석ROS수평여귀소분자표체지간적상관성.결과표명:PBMNC수동존시간연장존활솔축점강저,동존3、6、9、12개월적세포존활솔비동전현저강저(P＜0.05)；조혈간/조세포표면표지성항원CD34、CD133급귀소상관분자CD44、VLA4、CXCR4표체솔수동존시간적연장유소하강,냉동보존1년후적표체솔비동존전현저강저(P＜0.05)；수착냉동보존시간적연장,세포내ROS수평축점승고,동존6、9、12개월후세포내ROS수평비동존전현저승고(P＜0.05).PBMNC내ROS수평여조혈간/조세포CD34+ VLA4+、CD34+ CXCR4+、CD34+ CD44+쌍양성표체솔균정부상관(상관계수분별위-0.503、-0.457、-0.465).결론:조혈간/조세포적귀소점부분자표체수동존시간연장이축점하강；동존적PBMNC중적ROS수평여조혈간/조세포귀소점부분자표체솔성현저부상관；ROS수평증고가능시동존외주혈조혈간/조세포귀소공능강저적원인지일.