CAJ | 학술논문

本研究旨在观察多西他赛对人骨髓瘤细胞系RPMI8226增殖和凋亡的影响,探讨其作用的分子机制.采用MTT法检测骨髓瘤细胞增殖抑制率,光学显微镜及电子显微镜观察多西他赛对骨髓瘤细胞形态的影响,Annexin-Ⅴ FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,PI染色流式细胞术检测骨髓瘤细胞周期分布情况,半定量RT-PCR检测多西他赛对BCL-2、caspase-8及caspase-3 mRNA表达影响,Western blot法检测多西他赛作用前后骨髓瘤细胞BCL-2蛋白表达变化.结果显示:0.25-8.0μg/ml终浓度的多西他赛均可抑制RPMI8226细胞增殖,抑制率呈时间(r =0.927)和浓度(r=0.726)依赖性；多西他赛处理组光学显微镜下可见细胞数量明显减少,排列紊乱,高倍镜可见凋亡细胞,偶见坏死细胞；电子显微镜下可见细胞典型凋亡改变以及少数坏死细胞；多西他赛可明显诱导骨髓瘤细胞凋亡(P＜0.01),主要将细胞阻滞于G2/M期(P＜0.01),作用48 h时BCL-2 mRNA与BCL-2蛋白表达量减少(P＜0.05),caspase-8、caspase-3 mRNA表达量增加(P＜0.05).结论:多西他赛通过诱导细胞凋亡可抑制骨髓瘤细胞增殖,其诱导细胞凋亡可能与细胞周期阻滞,激活细胞内、外源性凋亡通路有关.
본연구지재관찰다서타새대인골수류세포계RPMI8226증식화조망적영향,탐토기작용적분자궤제.채용MTT법검측골수류세포증식억제솔,광학현미경급전자현미경관찰다서타새대골수류세포형태적영향,Annexin-Ⅴ FITC/PI쌍염류식세포술검측세포조망솔,PI염색류식세포술검측골수류세포주기분포정황,반정량RT-PCR검측다서타새대BCL-2、caspase-8급caspase-3 mRNA표체영향,Western blot법검측다서타새작용전후골수류세포BCL-2단백표체변화.결과현시:0.25-8.0μg/ml종농도적다서타새균가억제RPMI8226세포증식,억제솔정시간(r =0.927)화농도(r=0.726)의뢰성；다서타새처리조광학현미경하가견세포수량명현감소,배렬문란,고배경가견조망세포,우견배사세포；전자현미경하가견세포전형조망개변이급소수배사세포；다서타새가명현유도골수류세포조망(P＜0.01),주요장세포조체우G2/M기(P＜0.01),작용48 h시BCL-2 mRNA여BCL-2단백표체량감소(P＜0.05),caspase-8、caspase-3 mRNA표체량증가(P＜0.05).결론:다서타새통과유도세포조망가억제골수류세포증식,기유도세포조망가능여세포주기조체,격활세포내、외원성조망통로유관.