中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2013年
1期
188-192
,共5页
申星%郭玲玲%熊国林%董波%余祖胤%从玉文%罗庆良%邢爽
申星%郭玲玲%熊國林%董波%餘祖胤%從玉文%囉慶良%邢爽
신성%곽령령%웅국림%동파%여조윤%종옥문%라경량%형상
超氧化物歧化酶%骨髓间充质干细胞%腺病毒%基因转染%恒河猴
超氧化物歧化酶%骨髓間充質榦細胞%腺病毒%基因轉染%恆河猴
초양화물기화매%골수간충질간세포%선병독%기인전염%항하후
本研究旨在探讨载带超氧化物歧化酶基因的腺病毒(AD-ECSOD)感染恒河猴骨髓间充质干细胞(R-BMMSC)生物学特性的影响.用含有ECSOD和报告基因EGFP的腺病毒感染经梯度密度离心和贴壁培养法分离、培养并纯化的R-BMMSC,用倒置荧光显微镜及流式细胞仪观察检测感染效率,ELISA法检测细胞培养上清中的ECSOD蛋白表达水平；流式细胞仪检测感染后R-BMMSC的表面抗原(CD34,CD29,CD45,CD90,HLA-DR)；油红O和茜素红染色观察R-BMMSC的成骨及成脂诱导分化能力；MTr法检测AD-ECSOD转染对R-BMMSC增殖能力的影响.结果表明,不同滴度AD-ECSOD(感染滴度为每个细胞500,1000,l500和2000 pfu)对R-BMMSC的感染效率均＞95％.转染后24h即可在细胞上清液中检测到ECSOD蛋白表达,且明显高于对照组(P＜0.0l),转染后48 h蛋白表达量最高.AD-ECSOD转染后R-BMMSC的增殖能力及其表面抗原表达和多向分化能力与未转染组比较无统计学差异(P＞0.05).结论:AD-ECSOD能够高效转染R-BMMSC,对其生物学特性无明显影响.
本研究旨在探討載帶超氧化物歧化酶基因的腺病毒(AD-ECSOD)感染恆河猴骨髓間充質榦細胞(R-BMMSC)生物學特性的影響.用含有ECSOD和報告基因EGFP的腺病毒感染經梯度密度離心和貼壁培養法分離、培養併純化的R-BMMSC,用倒置熒光顯微鏡及流式細胞儀觀察檢測感染效率,ELISA法檢測細胞培養上清中的ECSOD蛋白錶達水平；流式細胞儀檢測感染後R-BMMSC的錶麵抗原(CD34,CD29,CD45,CD90,HLA-DR)；油紅O和茜素紅染色觀察R-BMMSC的成骨及成脂誘導分化能力；MTr法檢測AD-ECSOD轉染對R-BMMSC增殖能力的影響.結果錶明,不同滴度AD-ECSOD(感染滴度為每箇細胞500,1000,l500和2000 pfu)對R-BMMSC的感染效率均＞95％.轉染後24h即可在細胞上清液中檢測到ECSOD蛋白錶達,且明顯高于對照組(P＜0.0l),轉染後48 h蛋白錶達量最高.AD-ECSOD轉染後R-BMMSC的增殖能力及其錶麵抗原錶達和多嚮分化能力與未轉染組比較無統計學差異(P＞0.05).結論:AD-ECSOD能夠高效轉染R-BMMSC,對其生物學特性無明顯影響.
본연구지재탐토재대초양화물기화매기인적선병독(AD-ECSOD)감염항하후골수간충질간세포(R-BMMSC)생물학특성적영향.용함유ECSOD화보고기인EGFP적선병독감염경제도밀도리심화첩벽배양법분리、배양병순화적R-BMMSC,용도치형광현미경급류식세포의관찰검측감염효솔,ELISA법검측세포배양상청중적ECSOD단백표체수평；류식세포의검측감염후R-BMMSC적표면항원(CD34,CD29,CD45,CD90,HLA-DR)；유홍O화천소홍염색관찰R-BMMSC적성골급성지유도분화능력；MTr법검측AD-ECSOD전염대R-BMMSC증식능력적영향.결과표명,불동적도AD-ECSOD(감염적도위매개세포500,1000,l500화2000 pfu)대R-BMMSC적감염효솔균＞95％.전염후24h즉가재세포상청액중검측도ECSOD단백표체,차명현고우대조조(P＜0.0l),전염후48 h단백표체량최고.AD-ECSOD전염후R-BMMSC적증식능력급기표면항원표체화다향분화능력여미전염조비교무통계학차이(P＞0.05).결론:AD-ECSOD능구고효전염R-BMMSC,대기생물학특성무명현영향.
