中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2013年
1期
99-104
,共6页
刘保兰%刘心%周柰岑%齐美颖%徐波
劉保蘭%劉心%週柰岑%齊美穎%徐波
류보란%류심%주내잠%제미영%서파
多发性骨髓瘤%RPMI8226细胞株%奥沙利铂%细胞凋亡%caspase%Bcl-2
多髮性骨髓瘤%RPMI8226細胞株%奧沙利鉑%細胞凋亡%caspase%Bcl-2
다발성골수류%RPMI8226세포주%오사리박%세포조망%caspase%Bcl-2
本研究探讨奥沙利铂对人骨髓瘤细胞RPMI8226的增殖抑制作用及其分子机制.将奥沙利铂作用于骨髓瘤细胞,用MTT法检测细胞增殖抑制率,光学显微镜和电子显微镜观察细胞形态及超微结构变化,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期分布,半定量RT-PCR检测Bcl-2、caspase-8及caspase-3 mRNA表达量的变化,Western blot 检测Bcl-2蛋白表达量变化.结果表明,奥沙利铂可抑制RPMI8226细胞增殖,抑制率呈时间(r=0.979)和浓度(r=0.949)依赖性增强;24 h后在光学显微镜下可见奥沙利铂组细胞数量减少,排列紊乱,细胞形态变得不规则,体积变小,细胞碎片增多,可见凋亡细胞;48 h电子显微镜下可见细胞典型凋亡改变,凋亡小体形成.流式细胞术检测结果显示,奥沙利铂组RPMI8226细胞凋亡率明显增高(P<0.05);奥沙利铂作用24 h后,骨髓瘤细胞被阻滞于S期(P<0.05);而作用48 h后G0/G1期细胞所占比例明显增高(P<0.05);奥沙利铂作用48 h,细胞Bcl-2 mRNA与Bcl-2蛋白表达量未见明显变化,caspase-8及caspase-3 mRNA表达量增加(P<0.05).结论:奥沙利铂可诱导RPMI8226细胞凋亡,其机制可能与其将细胞阻滞于S期,上调caspase-8、caspase-3 mRNA表达有关;奥沙利铂诱导RPMI8226细胞凋亡可能不通过调节Bcl-2基因表达实现.
本研究探討奧沙利鉑對人骨髓瘤細胞RPMI8226的增殖抑製作用及其分子機製.將奧沙利鉑作用于骨髓瘤細胞,用MTT法檢測細胞增殖抑製率,光學顯微鏡和電子顯微鏡觀察細胞形態及超微結構變化,流式細胞術檢測細胞凋亡率和細胞週期分佈,半定量RT-PCR檢測Bcl-2、caspase-8及caspase-3 mRNA錶達量的變化,Western blot 檢測Bcl-2蛋白錶達量變化.結果錶明,奧沙利鉑可抑製RPMI8226細胞增殖,抑製率呈時間(r=0.979)和濃度(r=0.949)依賴性增彊;24 h後在光學顯微鏡下可見奧沙利鉑組細胞數量減少,排列紊亂,細胞形態變得不規則,體積變小,細胞碎片增多,可見凋亡細胞;48 h電子顯微鏡下可見細胞典型凋亡改變,凋亡小體形成.流式細胞術檢測結果顯示,奧沙利鉑組RPMI8226細胞凋亡率明顯增高(P<0.05);奧沙利鉑作用24 h後,骨髓瘤細胞被阻滯于S期(P<0.05);而作用48 h後G0/G1期細胞所佔比例明顯增高(P<0.05);奧沙利鉑作用48 h,細胞Bcl-2 mRNA與Bcl-2蛋白錶達量未見明顯變化,caspase-8及caspase-3 mRNA錶達量增加(P<0.05).結論:奧沙利鉑可誘導RPMI8226細胞凋亡,其機製可能與其將細胞阻滯于S期,上調caspase-8、caspase-3 mRNA錶達有關;奧沙利鉑誘導RPMI8226細胞凋亡可能不通過調節Bcl-2基因錶達實現.
본연구탐토오사리박대인골수류세포RPMI8226적증식억제작용급기분자궤제.장오사리박작용우골수류세포,용MTT법검측세포증식억제솔,광학현미경화전자현미경관찰세포형태급초미결구변화,류식세포술검측세포조망솔화세포주기분포,반정량RT-PCR검측Bcl-2、caspase-8급caspase-3 mRNA표체량적변화,Western blot 검측Bcl-2단백표체량변화.결과표명,오사리박가억제RPMI8226세포증식,억제솔정시간(r=0.979)화농도(r=0.949)의뢰성증강;24 h후재광학현미경하가견오사리박조세포수량감소,배렬문란,세포형태변득불규칙,체적변소,세포쇄편증다,가견조망세포;48 h전자현미경하가견세포전형조망개변,조망소체형성.류식세포술검측결과현시,오사리박조RPMI8226세포조망솔명현증고(P<0.05);오사리박작용24 h후,골수류세포피조체우S기(P<0.05);이작용48 h후G0/G1기세포소점비례명현증고(P<0.05);오사리박작용48 h,세포Bcl-2 mRNA여Bcl-2단백표체량미견명현변화,caspase-8급caspase-3 mRNA표체량증가(P<0.05).결론:오사리박가유도RPMI8226세포조망,기궤제가능여기장세포조체우S기,상조caspase-8、caspase-3 mRNA표체유관;오사리박유도RPMI8226세포조망가능불통과조절Bcl-2기인표체실현.