植物保护
植物保護
식물보호
PLANT PROTECTION
2013年
2期
86-90,100
,共6页
张盼%兰新芝%乔奇%张德胜%秦艳红%田雨婷%王爽%张振臣
張盼%蘭新芝%喬奇%張德勝%秦豔紅%田雨婷%王爽%張振臣
장반%란신지%교기%장덕성%진염홍%전우정%왕상%장진신
甘薯病毒病害%甘薯羽状斑驳病毒%甘薯褪绿矮化病毒%多重RT-PCR
甘藷病毒病害%甘藷羽狀斑駁病毒%甘藷褪綠矮化病毒%多重RT-PCR
감서병독병해%감서우상반박병독%감서퇴록왜화병독%다중RT-PCR
根据甘薯褪绿矮化病毒(Sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV)热激蛋白(Hsp70)基因和甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)外壳蛋白(CP)基因核苷酸序列的保守区域设计了4对引物,以单-RT-PCR反应体系为基础,分别对影响多重RT-PCR扩增的退火温度、Taq DNA聚合酶浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度、引物浓度等条件进行了优化,建立了能同时检测SPVD两种病原的多重RT-PCR方法.该方法能有效区分SPFMV的主要株系类型.灵敏性试验表明,建立的多重RT-PCR方法对SPFMV-CH2、SPFMV-CH和SPCSV的最低检测浓度分别为1.42×104、1.32×104拷贝/μL和2.47×104拷贝/μL.该方法可用于甘薯叶片和薯块中病毒的检测,为SPVD的监测预警提供了一个有用的工具.
根據甘藷褪綠矮化病毒(Sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV)熱激蛋白(Hsp70)基因和甘藷羽狀斑駁病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)外殼蛋白(CP)基因覈苷痠序列的保守區域設計瞭4對引物,以單-RT-PCR反應體繫為基礎,分彆對影響多重RT-PCR擴增的退火溫度、Taq DNA聚閤酶濃度、dNTPs濃度、Mg2+濃度、引物濃度等條件進行瞭優化,建立瞭能同時檢測SPVD兩種病原的多重RT-PCR方法.該方法能有效區分SPFMV的主要株繫類型.靈敏性試驗錶明,建立的多重RT-PCR方法對SPFMV-CH2、SPFMV-CH和SPCSV的最低檢測濃度分彆為1.42×104、1.32×104拷貝/μL和2.47×104拷貝/μL.該方法可用于甘藷葉片和藷塊中病毒的檢測,為SPVD的鑑測預警提供瞭一箇有用的工具.
근거감서퇴록왜화병독(Sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV)열격단백(Hsp70)기인화감서우상반박병독(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)외각단백(CP)기인핵감산서렬적보수구역설계료4대인물,이단-RT-PCR반응체계위기출,분별대영향다중RT-PCR확증적퇴화온도、Taq DNA취합매농도、dNTPs농도、Mg2+농도、인물농도등조건진행료우화,건립료능동시검측SPVD량충병원적다중RT-PCR방법.해방법능유효구분SPFMV적주요주계류형.령민성시험표명,건립적다중RT-PCR방법대SPFMV-CH2、SPFMV-CH화SPCSV적최저검측농도분별위1.42×104、1.32×104고패/μL화2.47×104고패/μL.해방법가용우감서협편화서괴중병독적검측,위SPVD적감측예경제공료일개유용적공구.
