内蒙古农业大学学报（自然科学版）
內矇古農業大學學報（自然科學版）
내몽고농업대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF INNER MONGOLIA AGRICULTURAL UNIIVERSITY
2012年
3期
5-8
,共4页
孙志明%周伟光%陈玉惠%高晶%希尼尼根%关平原
孫誌明%週偉光%陳玉惠%高晶%希尼尼根%關平原
손지명%주위광%진옥혜%고정%희니니근%관평원
牛传染性鼻气管炎病毒%荧光定量PCR%灵敏性%特异性
牛傳染性鼻氣管炎病毒%熒光定量PCR%靈敏性%特異性
우전염성비기관염병독%형광정량PCR%령민성%특이성
Bovine Rhinotracheitis virus%Real-time PCR%sensitivity%specificity
目的 建立1种特异、灵敏、高效的检测IBRV gE基因的荧光定量PCR方法,并为鉴别IBRV野毒株和gE基因缺失疫苗株的感染提供技术手段.方法 根据IBRV gE基因保守序列,设计一对引物,建立荧光定量PCR反应体系和反应条件,利用10倍梯度稀释病毒DNA进行荧光定量PCR扩增,以检测本试验建立的荧光定量PCR的灵敏度.用IBRV、牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒、MDBK细胞、牛血清等进行特异性检测.用模拟样品进行临床应用试验.结果 本试验建立的荧光定量PCR方法,其灵敏度约为70 DNA拷贝/μL,除了IBRV从其他病毒和样品未扩增出曲线,临床模拟样品检测结果为0.03TCID50.结论 本试验建立的荧光定量PCR方法具有特异性强、灵敏性高、快速,低污染等优点,因此临床上可以用于IBRV的检测和病原学调查.
目的 建立1種特異、靈敏、高效的檢測IBRV gE基因的熒光定量PCR方法,併為鑒彆IBRV野毒株和gE基因缺失疫苗株的感染提供技術手段.方法 根據IBRV gE基因保守序列,設計一對引物,建立熒光定量PCR反應體繫和反應條件,利用10倍梯度稀釋病毒DNA進行熒光定量PCR擴增,以檢測本試驗建立的熒光定量PCR的靈敏度.用IBRV、牛病毒性腹瀉病毒、牛輪狀病毒、MDBK細胞、牛血清等進行特異性檢測.用模擬樣品進行臨床應用試驗.結果 本試驗建立的熒光定量PCR方法,其靈敏度約為70 DNA拷貝/μL,除瞭IBRV從其他病毒和樣品未擴增齣麯線,臨床模擬樣品檢測結果為0.03TCID50.結論 本試驗建立的熒光定量PCR方法具有特異性彊、靈敏性高、快速,低汙染等優點,因此臨床上可以用于IBRV的檢測和病原學調查.
목적 건립1충특이、령민、고효적검측IBRV gE기인적형광정량PCR방법,병위감별IBRV야독주화gE기인결실역묘주적감염제공기술수단.방법 근거IBRV gE기인보수서렬,설계일대인물,건립형광정량PCR반응체계화반응조건,이용10배제도희석병독DNA진행형광정량PCR확증,이검측본시험건립적형광정량PCR적령민도.용IBRV、우병독성복사병독、우륜상병독、MDBK세포、우혈청등진행특이성검측.용모의양품진행림상응용시험.결과 본시험건립적형광정량PCR방법,기령민도약위70 DNA고패/μL,제료IBRV종기타병독화양품미확증출곡선,림상모의양품검측결과위0.03TCID50.결론 본시험건립적형광정량PCR방법구유특이성강、령민성고、쾌속,저오염등우점,인차림상상가이용우IBRV적검측화병원학조사.
