遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2013年
6期
778-785
,共8页
曹随忠%岳成鹤%李西睿%冯冲%龙川%潘登科
曹隨忠%嶽成鶴%李西睿%馮遲%龍川%潘登科
조수충%악성학%리서예%풍충%룡천%반등과
肌肉生长抑制素%基因敲除%五指山小型猪%锌指核酸酶%MSTN-/-成纤维细胞
肌肉生長抑製素%基因敲除%五指山小型豬%鋅指覈痠酶%MSTN-/-成纖維細胞
기육생장억제소%기인고제%오지산소형저%자지핵산매%MSTN-/-성섬유세포
敲除猪肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因可能提高猪瘦肉率,MSTN 基因敲除猪也可作为相关疾病的动物模型.文章利用锌指核酸酶(Zinc-finger nucleases,ZFNs)技术敲除五指山小型猪胎儿成纤维细胞MSTN基因,为制备MSTN 基因敲除猪奠定基础.ZFNs 质粒或编码ZFNs 的mRNA 均能高效敲除MSTN 基因,使用ZFNs mRNA 能直接得到MSTN+/-和MSTN-/-两种基因型的细胞克隆.DNA 序列测定与分析发现,细胞克隆的突变类型多为ZFNs 作用靶位点处不大于10 bp 的碱基插入或缺失(92.18 %); 氨基酸预测发现,突变型MSTN 基因的终止密码子常常提前出现.将MSTN 基因敲除的细胞进行体细胞核移植(Somatic cell nuclear transfer,SCNT)发现,胚胎体外早期发育潜力与野生型无显著差异,表明这些细胞可用于后续MSTN 基因敲除猪的制备.
敲除豬肌肉生長抑製素(Myostatin,MSTN)基因可能提高豬瘦肉率,MSTN 基因敲除豬也可作為相關疾病的動物模型.文章利用鋅指覈痠酶(Zinc-finger nucleases,ZFNs)技術敲除五指山小型豬胎兒成纖維細胞MSTN基因,為製備MSTN 基因敲除豬奠定基礎.ZFNs 質粒或編碼ZFNs 的mRNA 均能高效敲除MSTN 基因,使用ZFNs mRNA 能直接得到MSTN+/-和MSTN-/-兩種基因型的細胞剋隆.DNA 序列測定與分析髮現,細胞剋隆的突變類型多為ZFNs 作用靶位點處不大于10 bp 的堿基插入或缺失(92.18 %); 氨基痠預測髮現,突變型MSTN 基因的終止密碼子常常提前齣現.將MSTN 基因敲除的細胞進行體細胞覈移植(Somatic cell nuclear transfer,SCNT)髮現,胚胎體外早期髮育潛力與野生型無顯著差異,錶明這些細胞可用于後續MSTN 基因敲除豬的製備.
고제저기육생장억제소(Myostatin,MSTN)기인가능제고저수육솔,MSTN 기인고제저야가작위상관질병적동물모형.문장이용자지핵산매(Zinc-finger nucleases,ZFNs)기술고제오지산소형저태인성섬유세포MSTN기인,위제비MSTN 기인고제저전정기출.ZFNs 질립혹편마ZFNs 적mRNA 균능고효고제MSTN 기인,사용ZFNs mRNA 능직접득도MSTN+/-화MSTN-/-량충기인형적세포극륭.DNA 서렬측정여분석발현,세포극륭적돌변류형다위ZFNs 작용파위점처불대우10 bp 적감기삽입혹결실(92.18 %); 안기산예측발현,돌변형MSTN 기인적종지밀마자상상제전출현.장MSTN 기인고제적세포진행체세포핵이식(Somatic cell nuclear transfer,SCNT)발현,배태체외조기발육잠력여야생형무현저차이,표명저사세포가용우후속MSTN 기인고제저적제비.
