河北林果研究
河北林果研究
하북림과연구
HEBEI JOURNAL OF FORESTRY AND ORCHARD RESEARCH
2012年
4期
358-362
,共5页
张旭%王桂英%朱建锋%郑克举%王进茂
張旭%王桂英%硃建鋒%鄭剋舉%王進茂
장욱%왕계영%주건봉%정극거%왕진무
转双抗虫基因741杨%原生质体%游离%纯化
轉雙抗蟲基因741楊%原生質體%遊離%純化
전쌍항충기인741양%원생질체%유리%순화
以转双抗虫基因741杨无菌苗叶片为材料,对叶片原生质体游离、纯化方法及影响因素等进行了分析研究.结果表明,上部叶片产量和活力均高于其他叶位,在实验的浓度范围之内,Macerozyme R-10(离析酶)、Cellulase Onozuka R-10(纤维素酶)、Driselase (Sigma)(崩溃酶)对原生质体的产量和活力无显著影响.适宜转双抗虫基因741杨叶片原生质体游离与纯化的条件为无菌苗上部叶片为材料,0.7 mol/L甘露醇的CPW盐溶液预质壁分离1～1.5 h CPW+0.5％ Macerozyme R-10+0.25％ CellulaseOnozuka R-10+0.025％ Driselase (Sigma)+ 0.5 mol/L甘露醇(pH 5.7),酶解温度27℃,酶解时间10 h,用“过滤-离心-漂浮法”纯化原生质体.
以轉雙抗蟲基因741楊無菌苗葉片為材料,對葉片原生質體遊離、純化方法及影響因素等進行瞭分析研究.結果錶明,上部葉片產量和活力均高于其他葉位,在實驗的濃度範圍之內,Macerozyme R-10(離析酶)、Cellulase Onozuka R-10(纖維素酶)、Driselase (Sigma)(崩潰酶)對原生質體的產量和活力無顯著影響.適宜轉雙抗蟲基因741楊葉片原生質體遊離與純化的條件為無菌苗上部葉片為材料,0.7 mol/L甘露醇的CPW鹽溶液預質壁分離1～1.5 h CPW+0.5％ Macerozyme R-10+0.25％ CellulaseOnozuka R-10+0.025％ Driselase (Sigma)+ 0.5 mol/L甘露醇(pH 5.7),酶解溫度27℃,酶解時間10 h,用“過濾-離心-漂浮法”純化原生質體.
이전쌍항충기인741양무균묘협편위재료,대협편원생질체유리、순화방법급영향인소등진행료분석연구.결과표명,상부협편산량화활력균고우기타협위,재실험적농도범위지내,Macerozyme R-10(리석매)、Cellulase Onozuka R-10(섬유소매)、Driselase (Sigma)(붕궤매)대원생질체적산량화활력무현저영향.괄의전쌍항충기인741양협편원생질체유리여순화적조건위무균묘상부협편위재료,0.7 mol/L감로순적CPW염용액예질벽분리1～1.5 h CPW+0.5％ Macerozyme R-10+0.25％ CellulaseOnozuka R-10+0.025％ Driselase (Sigma)+ 0.5 mol/L감로순(pH 5.7),매해온도27℃,매해시간10 h,용“과려-리심-표부법”순화원생질체.
